Animal Tissue Direct PCR kit-UNG (სინჯის აღების ხელსაწყოების გარეშე) პროტოკოლი
აღწერილობები
ეს ნაკრები იყენებს უნიკალურ ლიზის ბუფერულ სისტემას ცხოველური ქსოვილის ნიმუშებიდან გენომიური დნმ-ის სწრაფად გასათავისუფლებლად PCR რეაქციებისთვის, ამიტომ იგი განსაკუთრებით შესაფერისია ფართომასშტაბიანი გენეტიკური ტესტირებისთვის.
ლიზის ბუფერიდან გენომიური დნმ-ის გამოთავისუფლების პროცესი სრულდება 10-30 წუთში 65°C ტემპერატურაზე.სხვა პროცესები, როგორიცაა ცილის და რნმ-ის მოცილება არ არის საჭირო და გამოთავისუფლებული კვალი დნმ შეიძლება გამოყენებულ იქნას როგორც შაბლონი PCR რეაქციისთვის.
2×PCR მარტივიTMMix (UNG) იყენებს dUTP-ს dTTP-ის ნაცვლად 2×PCR Easy-ის საფუძველზეTMშეურიეთ და დაამატეთ UNG ფერმენტი (ურაცილ-N-გლიკოზილაზა), რომელსაც შეუძლია ერთდროულად გააფუჭოს dUTP-ის შემცველი შაბლონი.PCR რეაქციამდე, UNG ფერმენტი გამოიყენება ურაცილის შემცველი PCR პროდუქტის დასაშლელად.UNG ფერმენტი არანაირ გავლენას არ მოახდენს შაბლონზე, რომელიც არ შეიცავს ურაცილს, რითაც უზრუნველყოფს გაძლიერების სპეციფიკას და სიზუსტეს და ხელს უშლის PCR პროდუქტების დაბინძურების შესაძლებლობას ფართომასშტაბიანი გენეტიკური ტესტირების დროს.
D-Taq დნმ პოლიმერაზა არის დნმ პოლიმერაზა, რომელიც სპეციალურად შეიქმნა Foregene-ის მიერ პირდაპირი PCR რეაქციებისთვის.D-Taq დნმ პოლიმერაზას აქვს ძლიერი ტოლერანტობა PCR რეაქციის სხვადასხვა ინჰიბიტორების მიმართ და შეუძლია ეფექტურად გააძლიეროს დნმ-ის კვალი რაოდენობა სხვადასხვა რთულ რეაქციის სისტემაში და გაძლიერების სიჩქარე შეიძლება მიაღწიოს 2Kb/წთ, რაც განსაკუთრებით შესაფერისია პირდაპირი PCR რეაქციისთვის.
ნაკრების კომპონენტები
ნაწილი I | ბუფერი AL |
ფორეგენის პროტეაზა | |
6× დნმ ჩატვირთვის ბუფერი | |
ნაწილი II | 2×PCR მარტივიTMმიქსი (UNG) |
მახასიათებლები და უპირატესობები
■არ არის შრომატევადი და ძვირადღირებული დნმ-ის გამწმენდი
■ ნიმუშის მოთხოვნა მცირეა, მხოლოდ 5 მგ ცხოველური ქსოვილის ტესტირება შესაძლებელია.
■ არ არის საჭირო სპეციალური დამუშავება, როგორიცაა დაფქვა და დამსხვრევა და ოპერაცია მარტივია.
■ ოპტიმიზებული PCR სისტემა ხდის PCR-ს უფრო მაღალი სპეციფიკურობისა და უფრო ძლიერი ტოლერანტობის PCR რეაქციის ინჰიბიტორების მიმართ.
■ დაბინძურების საწინააღმდეგო PCR სისტემა 2×PCR მარტივიაTMMix (UNG) ეფექტურად აცილებს PCR პროდუქტებით გამოწვეულ დაბინძურებას და უზრუნველყოფს ამპლიფიკაციის სპეციფიკასა და სიზუსტეს.
ნაკრების პარამეტრები
გამოყენება: მრავალფეროვანი ცხოველური ქსოვილი.
ნიმუშის ლიზისიდან გამოთავისუფლებული დნმ: გამოიყენება მხოლოდ PCR შაბლონად.
ნაკრები შეიძლება გამოყენებულ იქნას შემდეგი მიზნებისთვის: ტრანსგენოზის იდენტიფიკაცია, ცხოველთა გენოტიპირება და ა.შ.
სამუშაო ნაკადი
შენახვა და შენახვის ვადა
ამ ნაკრების I ნაწილი უნდა ინახებოდეს 2-8-ზე℃.
რეაგენტი ბუფერი AL შეიძლება ინახებოდეს 12 თვის განმავლობაში მშრალ პირობებში;მისი შენახვა შესაძლებელია 2-8 საათზე℃უფრო ხანგრძლივი შენახვისთვის.
Reagent Foregene Protease-ს აქვს უნიკალური ფორმულა.მისი აქტიურობისა და სტაბილურობის უზრუნველსაყოფად, გთხოვთ, შეინახოთ იგი 4-ზე℃12 თვის განმავლობაში.
რეაგენტი 6×დნმ ჩატვირთვის ბუფერი შეიძლება ინახებოდეს 4-ზე℃ან -20℃დიდი ხანის განმვლობაში.
ამ ნაკრების II ნაწილი უნდა ინახებოდეს -20-ზე℃.
რეაგენტი 2×PCR მარტივიაTMMix(UNG), თუ ხშირად გამოიყენება, ის ასევე შეიძლება შენახული იყოს 4-ზე℃მოკლევადიანი შენახვისთვის (გამოიყენება 10 დღის განმავლობაში).