ForeDirect RT-qPCR ნაკრები
ნაკრების აღწერა:
◮რნმ-ის პირდაპირი რეალურ დროში გაძლიერებისთვის ნაცხის კოლექციებიდან რნმ-ის გამწმენდი პროცესების გარეშე.ეს ნაკრები ასრულებს qRT-PCR ციკლებს ერთი საათის განმავლობაში.ფერმენტის ნარევი არის უკუ ტრანსკრიპტაზას, Hot-Start Taq დნმ პოლიმერაზას, RNase ინჰიბიტორის ოპტიმიზებული ნაზავი.რეაქციის ბუფერი შეიცავს ყველა საჭირო კომპონენტს, ოპტიმიზებული ბუფერული კომპონენტების ჩათვლით, Mg2+, dUTP და dNTP.
აღწერა
ForeDirect RT-qPCR ნაკრები შექმნილია რნმ-ის პირდაპირი რეალურ დროში გაძლიერებისთვის ნაცხის კოლექციებიდან რნმ-ის გამწმენდი პროცესების გარეშე.ეს ნაკრები ასრულებს qRT-PCR ციკლებს ერთი საათის განმავლობაში.ფერმენტის ნარევი არის უკუ ტრანსკრიპტაზას, Hot-Start Taq დნმ პოლიმერაზას, RNase ინჰიბიტორის ოპტიმიზებული ნაზავი.რეაქციის ბუფერი შეიცავს ყველა საჭირო კომპონენტს, ოპტიმიზებული ბუფერული კომპონენტების ჩათვლით, Mg2+, dUTP და dNTP.
სპეციფიკაციები
100 ტ
ნაკრების კომპონენტები
| ნუკლეინის მჟავის გათავისუფლების აგენტი |
| რნმ დამცავი |
| 2× RT-qPCR ბუფერი |
| ფერმენტის ნარევი (Taq&M-MLV) |
| ინსტრუქციები |
PCR აპლიკაცია
1. მას შემდეგ, რაც PCR რეაქციის მილები მოკლე დროში იქნება ცენტრიფუგირებული, მოათავსეთ ისინი გამაძლიერებელი ხელსაწყოს ნიმუშის ავზში.
2. თერმული პროტოკოლი
| ნაბიჯი | ტემპერატურა | დრო | ციკლები | |
| 1 | საპირისპირო ტრანსკრიფცია | 50℃ | 15 წთ | 1 |
| 2 | წინასწარი დენატურაცია | 95℃ | 1 წუთი | 1 |
| 3 | დენატურაცია | 95℃ | 10 წამი | 42 |
| 4 | Anneal/Extension | 60℃ | 30 წამი | |
Შენიშვნა:ფლუორესცენტური სიგნალი გამოვლინდა დაუყოვნებლივ ყოველი ციკლის გაფართოების საფეხურის შემდეგ.
3. დაყენების შემდეგ შეინახეთ ფაილი და გაუშვით რეაქციის პროგრამა.
საოპერაციო ნაბიჯები
რეაგენტის მომზადებამდე კომპლექტში შემავალი ყველა რეაგენტი უნდა გაიყინოს ოთახის ტემპერატურაზე და ნაზად შეურიოს.
რეაგენტის მომზადება
1. მოამზადეთ ნუკლეინის მჟავის გამოთავისუფლების ნარევი
| Კომპონენტი | მოცულობა თითო ნიმუშზე ან კონტროლზე |
| ნუკლეინის მჟავის გათავისუფლების აგენტი | 5 მლ |
| რნმ დამცავი | 0,5 მლ |
2. მოამზადეთ რეაქციის ნარევი
| Კომპონენტი | მოცულობა თითო ნიმუშზე ან კონტროლზე |
| 2× RT-qPCR ბუფერი | 15 მლ |
| ფერმენტის ნარევი (Taq&M-MLV) | 1.5 მლ |
| პრაიმერები და ზონდები | 1მკლ |
შენახვა და შენახვის ვადა
- ნაკრები უნდა ინახებოდეს -20-ზე± 5℃.მოქმედების ვადაა 12 თვე.
- მოერიდეთ გაყინვა-დათბობის განმეორებით ციკლებს (<5 ციკლი).
