Lnc-RT Heroᵀᴹ I (gDNase) (სუპერ პრემიქსი პირველი ჯაჭვის cDNA სინთეზისთვის lncRNA-დან)
სპეციფიკაციები
25×20μლ Rxns, 50×20μლ Rxns
Lnc-RT HeroTM I (gDNase-ით) არის საპირისპირო ტრანსკრიფციის სისტემა, რომელიც სპეციალურად შემუშავებულია lncRNA-სთვის გენომიური დნმ-ის დაბინძურების სწრაფად მოსაშორებლად.5×gDNase Mix-ს შეუძლია სწრაფად ამოიღოს დარჩენილი გენომი რნმ-ში 42°C ტემპერატურაზე 2 წუთის განმავლობაში, ეფექტურად თავიდან აიცილებს გენომის ჩარევას qPCR შედეგებზე.
5×L-RT HeroTM Mix შეიცავს Foregene LncRNA საპირისპირო ტრანსკრიპტაზას სპეციალურად შემუშავებული Foregene-ის მიერ, რომელიც არის ახალი ტიპის საპირისპირო ტრანსკრიპტაზა, სპეციალურად lncRNA და სხვა გრძელი რნმ კომპლექსური შაბლონებისთვის, უფრო ძლიერი რნმ-ის აფინურობით და შებრუნების ჩაწერის უფრო მაღალი ეფექტურობით.ოპტიმიზებული სისტემა აჩქარებს საპირისპირო ტრანსკრიფციის სიჩქარეს და შეუძლია ადვილად გადაიწეროს რნმ-ის შაბლონები მაღალი GC შემცველობით და რთული მეორადი სტრუქტურით.პირველი ჯაჭვის cDNA სინთეზი შეიძლება დასრულდეს 42°C ტემპერატურაზე 15 წუთში.
ნაკრების კომპონენტები
5× gDNase Mix |
5× L-RT HeroTM Mix |
RNase-ის გარეშე ddH2O |
ინსტრუქციები |
მახასიათებლები და უპირატესობები
■გდნმ-ის ამოღების ეფექტური უნარი, რომელსაც შეუძლია შაბლონში გდნმ-ის ამოღება 2 წუთში.
■ მას შეუძლია ეფექტურად შეცვალოს lncRNA-ს ტრანსკრიფცია.როდესაც საპირისპირო ტრანსკრიფციის პროდუქტი ექვემდებარება qPCR, Ct მნიშვნელობა უფრო დაბალია, ვიდრე ჩვეულებრივი საპირისპირო ტრანსკრიფციის სისტემა.
■ ეფექტური საპირისპირო ტრანსკრიფციის სისტემა, პირველი ჯაჭვის cDNA-ს სინთეზის დასრულებას მხოლოდ 15 წუთი სჭირდება.
■ რთული შაბლონები: შაბლონები მაღალი GC შემცველობით და რთული მეორადი სტრუქტურით ასევე შეიძლება შეცვალოს მაღალი ეფექტურობით.
■ მაღალი მგრძნობელობის საპირისპირო ტრანსკრიფციის სისტემა, pg დონის შაბლონებს ასევე შეუძლიათ მიიღონ მაღალი ხარისხის cDNA.
■ საპირისპირო ტრანსკრიფციის სისტემას აქვს მაღალი თერმული სტაბილურობა, რეაქციის ოპტიმალური ტემპერატურაა 42℃, და მას ჯერ კიდევ აქვს კარგი საპირისპირო ტრანსკრიფციის შესრულება 50-ზე℃.
ნაკრების აპლიკაცია
lncRNA ფარდობითი რაოდენობრივი ანალიზი.
lncRNA აბსოლუტური რაოდენობრივი ანალიზი.
მას შეუძლია სწრაფად და ზუსტად გაანალიზოს კვალი რნმ, როგორიცაა რნმ ვირუსი.
რნმ-ის შაბლონების შებრუნებული ტრანსკრიფცია GC მაღალი შემცველობით ან რთული მეორადი სტრუქტურით.
სამუშაო ნაკადი
შენახვა და შენახვის ვადა
ნაკრები უნდა ინახებოდეს -20-ზე°გ. შეინახეთ პროდუქტი მუდმივი ტემპერატურის მაცივარში -20 ტემპერატურაზე°C დაუყოვნებლივ მიღების შემდეგ.თუ შენახვის პირობები შესაბამისია, პროდუქტი არ დააქვეითებს არანაირ ეფექტურობას 1 წლის მოქმედების პერიოდში.
პრობლემის ანალიზის გზამკვლევი
The following is an analysis of the problems that may be encountered in the use of Lnc-RT HeroTM I (With gDNase) series kits, hoping to be helpful to your experiments. In addition, we have dedicated technical support to help you with other experimental or technical problems beyond the operating instructions and questions. If you have any needs, please contact us: 028-83361257 or E-mail: Tech@foregene.com.
Non-სპეციფიკური გაძლიერება
1. პრაიმერის არაგონივრული დიზაინი
რეკომენდაცია: პრაიმერების დაპროექტება პრაიმერის დიზაინის პრინციპების მიხედვით.
2. გენომის ნარჩენები.
შემოთავაზება: დარწმუნდით, რომ გდნმ-ის მოცილების რეაქციის პირველი ნაბიჯი არის 42°C და რეაქციის დრო ასევე შეიძლება გაიზარდოს 5 წუთამდე.
არ არის გამაძლიერებელი სიგნალი RT-qPCR-ით
1. რნმ დეგრადირებულია.
რეკომენდაცია: რნმ-ის ექსტრაქციის მასალა უნდა იყოს რაც შეიძლება ახალი და გამოყენებული იქნას მაღალი ხარისხის და მაღალი სისუფთავის რნმ.
2. რნმ შეიცავს ინჰიბიტორებს.
რეკომენდაცია: საპირისპირო ტრანსკრიფციის ინჰიბიტორები, როგორც წესი, მოიცავს SDS, გუანიდინის მარილებს, EDTA და ა.შ. ინჰიბიტორების მოსაშორებლად რეკომენდებულია რნმ-ის ნალექის გარეცხვა 70% ეთანოლით.
3. პრაიმერის დიზაინის საკითხები.
რეკომენდაცია: პრაიმერის დიზაინის პრინციპის მიხედვით, გადააკეთეთ პრაიმერები შესამოწმებლად.
სამიზნე ზოლი გამოჩნდება ცარიელ კონტროლში
1. საოპერაციო ხელსაწყოების ან რეაგენტების დაბინძურება.
რეკომენდაცია: ექსპერიმენტისთვის ყველა რეაგენტი ან მოწყობილობა ავტოკლავირებული უნდა იყოს.იყავით ფრთხილად და ნაზად მოპყრობისას, რათა თავიდან აიცილოთ დნმ-ის ნიმუშების პიპეტში შეწოვა ან ცენტრიფუგის მილიდან გადმოღვრა.
2. დაბინძურება მოხდა PCR რეაქციის სისტემის მომზადების დროს.
რეკომენდაცია: დაიცავით სიფრთხილის აუცილებელი ზომები, როგორიცაა: ლატექსის ხელთათმანების ტარება, ფილტრის რჩევების გამოყენება.გამოიყენეთ რეალურ დროში PCR Mix დაბინძურების საწინააღმდეგო სისტემაში.
3. პრაიმერები დეგრადირებულია.
წინადადება: გამოიყენეთ SDS-PAGE ელექტროფორეზი, რათა დადგინდეს, არის თუ არა პრაიმერები დეგრადირებული და ჩაანაცვლეთ ახალი პრაიმერებით ფლუორესცენციის გამოვლენის ექსპერიმენტებისთვის.
Ინსტრუქციის სახელმძღვანელო: