• ფეისბუქი
  • linkedin
  • youtube

ანტისხეულები, რომლებსაც ასევე უწოდებენ იმუნოგლობულინებს (Ig), არის გლიკოპროტეინები, რომლებიც სპეციალურად აკავშირებენ ანტიგენებს.
 
ჩვეულებრივი ანტისხეულების მომზადება წარმოიქმნება ცხოველების იმუნიზაციით და ანტიშრატის შეგროვებით.ამიტომ, ანტიშრატი, როგორც წესი, შეიცავს ანტისხეულებს შრატში სხვა შეუთავსებელი ანტიგენებისა და სხვა ცილის კომპონენტების წინააღმდეგ.ზოგადი ანტიგენის მოლეკულები ძირითადად შეიცავს მრავალ განსხვავებულ ეპიტოპს, ამიტომ ჩვეულებრივი ანტისხეულები ასევე არის ანტისხეულების ნარევი მრავალი სხვადასხვა ეპიტოპის წინააღმდეგ.ჩვეულებრივი შრატის ანტისხეულებიც კი, რომლებიც მიმართულია იმავე ეპიტოპის წინააღმდეგ, კვლავ შედგება ჰეტეროგენული ანტისხეულებისგან, რომლებიც წარმოიქმნება სხვადასხვა B უჯრედების კლონებით.ამიტომ, ჩვეულებრივი შრატის ანტისხეულებს ასევე უწოდებენ პოლიკლონურ ანტისხეულებს, ან მოკლედ პოლიკლონურ ანტისხეულებს.
 
მონოკლონური ანტისხეული (მონოკლონური ანტისხეული) არის უაღრესად ერთგვაროვანი ანტისხეული, რომელიც წარმოიქმნება ერთი B უჯრედის კლონის მიერ და მიმართულია მხოლოდ კონკრეტული ეპიტოპის წინააღმდეგ.ის ჩვეულებრივ მზადდება ჰიბრიდომის ტექნოლოგიით - ჰიბრიდომის ანტისხეულების ტექნოლოგია დაფუძნებულია უჯრედების შერწყმის ტექნოლოგიაზე, რომელიც აერთიანებს B უჯრედებს სპეციფიური ანტისხეულების სეკრეციის უნარს და მიელომას უჯრედებს უსასრულო ზრდის უნარით B-უჯრედების ჰიბრიდომებში.ამ ჰიბრიდომა უჯრედს აქვს მშობელი უჯრედის მახასიათებლები.მას შეუძლია განუსაზღვრელი და უკვდავი გამრავლება in vitro მიელომის უჯრედების მსგავსად, და მას შეუძლია სინთეზირება და გამოყოფა სპეციფიური ანტისხეულების, როგორიცაა ელენთის ლიმფოციტები.კლონირების საშუალებით შესაძლებელია მონოკლონური ხაზის მიღება, რომელიც წარმოიქმნება ერთი ჰიბრიდომა უჯრედიდან, ანუ ჰიბრიდომის უჯრედული ხაზი.მის მიერ წარმოქმნილი ანტისხეულები არის უაღრესად ჰომოგენური ანტისხეულები იგივე ანტიგენური დეტერმინანტის, ანუ მონოკლონური ანტისხეულების მიმართ.
 
ანტისხეულები არსებობს როგორც ერთი ან მეტი Y- ფორმის მონომერი (ანუ მონოკლონური ანტისხეულები ან პოლიკლონური ანტისხეულები).თითოეული Y- ფორმის მონომერი შედგება 4 პოლიპეპტიდური ჯაჭვისგან, მათ შორის ორი იდენტური მძიმე ჯაჭვისა და ორი იდენტური მსუბუქი ჯაჭვისგან.მსუბუქი და მძიმე ჯაჭვი დასახელებულია მათი მოლეკულური წონის მიხედვით.Y- ფორმის სტრუქტურის ზედა ნაწილი არის ცვლადი რეგიონი, რომელიც არის ანტიგენის შებოჭვის ადგილი.(ამონარიდი Detai Bio-Monoclonal Antibody Concept-დან)
 
ანტისხეულების სტრუქტურა
1მძიმე ჯაჭვი
არსებობს ძუძუმწოვართა Ig მძიმე ჯაჭვების ხუთი ტიპი, რომელთა სახელები ბერძნული ასოებით α, δ, ε, γ და μ.შესაბამის ანტისხეულებს უწოდებენ IgA, IgD, IgE, IgG და IgM.სხვადასხვა მძიმე ჯაჭვები განსხვავდება ზომითა და შემადგენლობით.α და γ შეიცავს დაახლოებით 450 ამინომჟავას, ხოლო μ და ε შეიცავს დაახლოებით 550 ამინომჟავას.
თითოეულ მძიმე ჯაჭვს აქვს ორი რეგიონი: მუდმივი რეგიონი და ცვლადი რეგიონი.ერთი და იგივე ტიპის ყველა ანტისხეულს აქვს იგივე მუდმივი რეგიონი, მაგრამ არსებობს განსხვავებები სხვადასხვა ტიპის ანტისხეულებს შორის.γ, α და δ მძიმე ჯაჭვების მუდმივი რეგიონები შედგება სამი Ig დომენისგან ტანდემში, ჰინგის რეგიონით მისი მოქნილობის გაზრდის მიზნით;მძიმე ჯაჭვების μ და ε მუდმივი რეგიონები შედგება 4 Ig დომენისგან.სხვადასხვა B უჯრედების მიერ წარმოებული ანტისხეულების მძიმე ჯაჭვის ცვლადი რეგიონი განსხვავებულია, მაგრამ იგივე B უჯრედის ან უჯრედის კლონის მიერ წარმოებული ანტისხეულების ცვლადი რეგიონი იგივეა, ხოლო თითოეული მძიმე ჯაჭვის ცვლადი რეგიონი დაახლოებით 110 ამინომჟავის სიგრძეა., და შექმენით ერთი Ig დომენი.
 
მსუბუქი ჯაჭვი
ძუძუმწოვრებში არსებობს მხოლოდ ორი სახის მსუბუქი ჯაჭვები: ლამბდას ტიპი და კაპას ტიპი.თითოეულ მსუბუქ ჯაჭვს აქვს ორი დაკავშირებული დომენი: მუდმივი რეგიონი და ცვლადი რეგიონი.მსუბუქი ჯაჭვის სიგრძე დაახლოებით 211-217 ამინომჟავაა.თითოეულ ანტისხეულში შემავალი ორი მსუბუქი ჯაჭვი ყოველთვის ერთნაირია.ძუძუმწოვრებისთვის, თითოეულ ანტისხეულში მსუბუქი ჯაჭვი მხოლოდ ერთი ტიპია: კაპა ან ლამბდა.ზოგიერთ ქვედა ხერხემლიანში, როგორიცაა ხრტილოვანი თევზები (ხრტილოვანი თევზები) და ძვლოვანი თევზები, ასევე გვხვდება სხვა სახის მსუბუქი ჯაჭვები, როგორიცაა იოტა (იოტა) ტიპი.
 
Fab და Fc სეგმენტები
Fc სეგმენტი შეიძლება პირდაპირ იყოს შერწყმული ფერმენტებთან ან ფლუორესცენტურ საღებავებთან ანტისხეულების მარკირებისთვის.ეს არის ნაწილი, სადაც ანტისხეული მოქლონდება ფირფიტაზე ELISA პროცესის დროს, და ასევე არის ნაწილი, სადაც მეორე ანტისხეული ამოიცნობს და აკავშირებს იმუნოპრეციპიტაციაში, იმუნობლოტირებასა და იმუნოჰისტოქიმიაში.ანტისხეულები შეიძლება ჰიდროლიზდეს ორ F(ab) სეგმენტად და ერთ Fc სეგმენტად პროტეოლიზური ფერმენტებით, როგორიცაა პაპაინი, ან ისინი შეიძლება დაიშალოს ჰინგის რეგიონიდან პეპსინის მიერ და ჰიდროლიზდეს ერთ F(ab)2 სეგმენტად და ერთ Fc სეგმენტად.IgG ანტისხეულების ფრაგმენტები ზოგჯერ ძალიან სასარგებლოა.Fc სეგმენტის ნაკლებობის გამო, F(ab) სეგმენტი არ ილექება ანტიგენთან და არც იქნება დაჭერილი იმუნური უჯრედების მიერ in vivo კვლევებში.მცირე მოლეკულური ფრაგმენტებისა და ჯვარედინი დამაკავშირებელი ფუნქციის არარსებობის გამო (Fc სეგმენტის არარსებობის გამო), Fab სეგმენტი ჩვეულებრივ გამოიყენება ფუნქციონალურ კვლევებში რადიოეტიკეტირებისთვის, ხოლო Fc სეგმენტი ძირითადად გამოიყენება როგორც მაბლოკირებელი აგენტი ჰისტოქიმიური შეღებვისას.
 
ცვალებადი და მუდმივი რეგიონები
ცვლადი რეგიონი (V რეგიონი) მდებარეობს H ჯაჭვის 1/5 ან 1/4 (შეიცავს დაახლოებით 118 ამინომჟავის ნარჩენებს) N-ბოლოსთან და 1/2 (შეიცავს დაახლოებით 108-111 ამინომჟავის ნარჩენებს) L ჯაჭვის N-ბოლოსთან ახლოს.თითოეულ V რეგიონს აქვს პეპტიდური რგოლი, რომელიც წარმოიქმნება შიდა ჯაჭვის დისულფიდური ბმებით და თითოეული პეპტიდური რგოლი შეიცავს დაახლოებით 67-დან 75 ამინომჟავის ნარჩენს.ამინომჟავების შემადგენლობა და განლაგება V რეგიონში განსაზღვრავს ანტისხეულის ანტიგენის დამაკავშირებელ სპეციფიკას.V რეგიონში ამინომჟავების მუდმივად ცვალებადი ტიპებისა და თანმიმდევრობის გამო, შეიძლება წარმოიქმნას მრავალი სახის ანტისხეული სხვადასხვა შემაკავშირებელ ანტიგენის სპეციფიკურობით.L ჯაჭვის და H ჯაჭვის V რეგიონებს შესაბამისად VL და VH ეწოდება.VL-ში და VH-ში, ზოგიერთი ადგილობრივი რეგიონის ამინომჟავების შემადგენლობა და თანმიმდევრობა აქვს ვარიაციის უფრო მაღალი ხარისხი.ამ რეგიონებს ჰიპერცვალებადი რეგიონები (HVR) ეწოდება.ამინომჟავების შემადგენლობა და არა-HVR ნაწილების განლაგება V რეგიონში შედარებით კონსერვატიულია, რომელსაც ჩარჩო რეგიონი ეწოდება.VL-ში არის სამი ჰიპერცვლადი რეგიონი, რომლებიც ჩვეულებრივ განლაგებულია ამინომჟავების ნარჩენებზე შესაბამისად 24-დან 34-მდე და 89-დან 97-მდე.VL და VH სამი HVR ეწოდება HVR1, HVR2 და HVR3, შესაბამისად.რენტგენის კრისტალური დიფრაქციის კვლევამ და ანალიზმა დაამტკიცა, რომ ჰიპერცვლადი რეგიონი მართლაც არის ადგილი, სადაც ანტისხეულების ანტიგენი აკავშირებს, ამიტომ მას ეწოდება კომპლემენტარობის განმსაზღვრელი რეგიონი (CDR).VL და VH-ის HVR1, HVR2 და HVR3 შეიძლება ეწოდოს შესაბამისად CDR1, CDR2 და CDR3.ზოგადად, CDR3-ს აქვს ჰიპერცვალებადობის უფრო მაღალი ხარისხი.ჰიპერცვლადი რეგიონი ასევე არის მთავარი ადგილი, სადაც არსებობს Ig მოლეკულების იდიოტიპური დეტერმინანტები.უმეტეს შემთხვევაში, H ჯაჭვი უფრო მნიშვნელოვან როლს ასრულებს ანტიგენთან შეკავშირებაში.
2მუდმივი რეგიონი (C რეგიონი)მდებარეობს H ჯაჭვის 3/4 ან 4/5 (დაახლოებით ამინომჟავა 119-დან C ტერმინალამდე) C ბოლოსთან ახლოს და 1/2 (შეიცავს დაახლოებით 105 ამინომჟავის ნარჩენებს) L ჯაჭვის C ბოლოსთან ახლოს.H ჯაჭვის თითოეული ფუნქციური რეგიონი შეიცავს დაახლოებით 110 ამინომჟავის ნარჩენს და შეიცავს პეპტიდურ რგოლს, რომელიც შედგება 50-60 ამინომჟავის ნარჩენებისგან, რომლებიც დაკავშირებულია დისულფიდური ბმებით.ამ რეგიონის ამინომჟავების შემადგენლობა და განლაგება შედარებით მუდმივია იმავე ცხოველის Ig იზოტიპის L ჯაჭვში და იგივე ტიპის H ჯაჭვში.იგივე, მას შეუძლია მხოლოდ კონკრეტულად დაუკავშირდეს შესაბამის ანტიგენს, მაგრამ მისი C რეგიონის სტრუქტურა იგივეა, ანუ მას აქვს იგივე ანტიგენურობა.ცხენის საწინააღმდეგო ადამიანის IgG მეორადი ანტისხეული (ან ანტისხეული) შეიძლება გაერთიანდეს ორთან. წარმოიქმნება ანტისხეულების (IgG) კომბინაცია სხვადასხვა ეგზოტოქსინების წინააღმდეგ.ეს არის მნიშვნელოვანი საფუძველი მეორადი ანტისხეულების მოსამზადებლად და ფლუორესცეინის, იზოტოპების, ფერმენტების და სხვა მარკირებული ანტისხეულების გამოყენებისთვის.
 
 
Მსგავსი პროდუქტები:
Cell Direct RT-qPCR ნაკრები

 

 


გამოქვეყნების დრო: სექ-30-2021