• ფეისბუქი
  • linkedin
  • youtube

შესავალი:

რნმ, სამეცნიერო სახელწოდება რიბონუკლეინის მჟავა, მისი აბრევიატურა მომდინარეობს RiboNucleic Acid-დან, არის ნუკლეინის მჟავის ტიპი, რომელიც წარმოიქმნება სულ მცირე ათობით რიბონუკლეოტიდის მიერ ფოსფოდიესტერული ობლიგაციების საშუალებით.

რნმ-ის კვლევის საფუძველია დაბინძურებისგან თავისუფალი მთლიანი რნმ-ის ამოღება და რნმ-ის ექსტრაქციის ძირითადი პრინციპი უხეშად შეიძლება შეჯამდეს შემდეგნაირად:

1. ჯერ უჯრედები დაშალეთ

2. შემდეგ ამოიღეთ მაკრომოლეკულური მინარევები (ცილები, ლიპიდები, დნმ და ა.შ.)

3. საბოლოოდ, რნმ დალექილია მარილებისა და ორგანული გამხსნელების მოცილებისას და რნმ-ის შემდგომი გაწმენდისას.

მოპოვების მეთოდის წარსული და აწმყო

რნმ-ის ექსტრაქციის მეთოდის პირველი თაობა არის TRIZol-ის დალექვის მეთოდი (გამოყენებული რეაგენტები მოიცავს გუანიდინის იზოთიოციანატს, ფენოლს, ქლოროფორმს და ა.

ფჯღჯ

მოგვიანებით, ბაბუამ მიჰყიდა ეს პატენტი ინვიტროგენს, ინვიტროგენმა კი ეს მეთოდი გაავრცელა მსოფლიოში და გახდა ფართოდ გამოყენებული მეთოდი.

მოგვიანებით ინვიტროგენი თერმომ შეიძინა!

წარმომადგენლობითი პროდუქტი: ინვიტროგენის ტრიზოლის რეაგენტი

cjgh

თუმცა, ტრიზოლის დალექვის მეთოდი მოითხოვს მრავალჯერადი დალექვას და რნმ-ის ექსტრაქციას, ხოლო გამოყენებული რეაგენტები ტოქსიკურია და ფუნქციონირებას დიდი დრო სჭირდება.

ამრიგად, გაჩნდა მეორე თაობის სვეტ-ფერმენტის გაწმენდის მეთოდი, რომელიც გამოიყენებოდა სილიკა გელის მემბრანას, როგორც სპეციფიკურ ნუკლეინის მჟავას ადსორბციულ მასალას, ნიმუშში რნმ-ის მაქსიმალური აღდგენის მიზნით, ხოლო სხვა მინარევებისაგან.

მეორე თაობის მეთოდი ამარტივებს ოპერაციას სტაბილური შესრულების საფუძველზე, ამცირებს რისკის ფაქტორს და აუმჯობესებს რნმ-ის ექსტრაქციის ეფექტურობას.

წარმომადგენლობითი პროდუქტები: QIAGEN RNeasy და ყველაზე შიდა პროდუქტები

ღჯფღ

თუმცა, როგორც პირველი, ასევე მეორე თაობის მეთოდები მოითხოვს DNase-ს გამოყენებას დნმ-ის დაბინძურების მოსაშორებლად, რაც გარკვეულ დისკომფორტს უქმნის შემდგომ ქვედა დინების ექსპერიმენტებს.ნარჩენი DNase შეამცირებს საპირისპირო ტრანსკრიფციის ეფექტურობას და შეამცირებს პირველი ჯაჭვის cDNA სინთეზს, რითაც გავლენას მოახდენს შედეგების სიზუსტეზე.

აქედან გამომდინარე, მესამე თაობის მოპოვების მეთოდი ოპტიმიზებულია მეორე თაობის საფუძველზე.ექსპერიმენტს არ სჭირდება რაიმე ფერმენტის დამატება და რნმ-ის მიღება მარტივად შეიძლება მხოლოდ ორი სვეტით.

სვეტი 1: დნმ-ის გამწმენდი სვეტი დნმ-ის გასასუფთავებლად

სვეტი 2: მხოლოდ რნმ-ის სვეტი სპეციალურად შთანთქავს და აღადგენს რნმ-ს

ასეთი მარტივი ოპერაცია არა მხოლოდ ზოგავს დროს, არამედ ხელს უწყობს ქვედა დინების ექსპერიმენტების მუშაობას!

წარმომადგენლობითი პროდუქტები: QIAGEN RNeasy Plus დაფორეგენირნმ გამწმენდი სერიის პროდუქტები

cgjfgj

(RNeasy Plus)

ვღჯღ

(ფორეგენისმცენარეთა მთლიანი რნმ-ის იზოლაციის ნაკრები)

ჩუმად გეტყვი!Foregene-ის რნმ-ის კომპლექტში ასევე წარმოდგენილია სუპერ ადვილად გამოსაყენებელი RNase Eraser, რომელსაც შეუძლია მთლიანად ამოიღოს 400 μg RNase მყარ ზედაპირზე 1 წუთში, ადამიანის ორგანიზმში რაიმე ტოქსიკური ნივთიერების დამატების გარეშე!

ნახატი1: ოპერაციული პროცესის შედარების სქემა

cjcghj

Foregene-ის პროდუქტებს შეუძლიათ დაასრულონ რნმ-ის ექსტრაქცია მხოლოდ ორ სიმღერაში, ნუ შეაშურებთ სხვებს თქვენი ექსპერიმენტის პროგრესის გამო!

ნახატი2:Eექსპერიმენტული შედეგები შედარების სქემა

პირველი თაობა (1: ტრიზოლი)

მეორე თაობა (2: QIAGEN-ის RNeasy)

მესამე თაობა (3: QIAGEN-ის RNeasy plus, 4: Foregene)

ღჯღქ

ნახატი3: qPCR გრაფიკი (გაძლიერების მრუდის გრაფიკი)

პირველი თაობა (მწვანე ნიშნავს TRIzol -, წითელი ნიშნავს TRIzol +)

jhkgjhfg

მეორე თაობა (ცისფერი ნიშნავს QIAGEN RNeasy-, წითელი ნიშნავს QIAGEN RNeasy +)

cjh1

მესამე თაობა (ლურჯი ნიშნავს QIAGEN RNeasy plus, მწვანე ნიშნავს Foregene)

fgjgy2

(შენიშვნა: qPCR გრაფიკი "-" მიუთითებს, რომ DNase არ არის დამატებული და დნმ-ის დაბინძურება არ არის მოხსნილი. ამიტომ, CT არის უფრო მაღალი და შედეგი არ არის ზუსტი; "+" მიუთითებს, რომ DNase დამატებულია და დნმ-ის დაბინძურება ამოღებულია, შედეგი ზუსტია)

ყოველი ტექნიკური განახლება ნიშნავს, რომ ექსპერიმენტის მოქმედება უფრო მარტივი და მოსახერხებელი მიმართულებით ვითარდება.

Foregene-ის მიზანია დაეხმაროს უფრო მეტ მეცნიერ მკვლევარს დაზოგონ ექსპერიმენტული დრო და ღირებულება, მიიღონ მაღალი ხარისხის ექსპერიმენტული შედეგები და ერთობლივად შექმნან უფრო ღირებული სამეცნიერო კვლევის მიღწევები.


გამოქვეყნების დრო: ივლის-09-2021