• ფეისბუქი
  • linkedin
  • youtube

1: დროულად შეცვალეთ ექსპერიმენტული მარაგი

news812 (1) 

დააყენეთ (NTC) უარყოფითი კონტროლი და გაიმეორეთ ის ბევრჯერ.როგორც კი აღმოაჩენთ, რომ არის PCR პროდუქტის დაბინძურება ლაბორატორიაში, დროულად შეცვალეთ ყველა ექსპერიმენტული მასალა.როგორიცაა: პრაიმერების ხელახლა განზავება და მომზადება, პიპეტის წვერის ხელახლა სტერილიზაცია, EP მილის, ddH2O და ა.შ., ჩანაცვლება ახალი პიპეტით და დროებით სესხება სხვა ლაბორატორიებში PCR ექსპერიმენტების ჩასატარებლად.დაბინძურებული ლაბორატორია უნდა იყოს ვენტილირებადი და დასხივებული ულტრაიისფერი სხივებით, სანამ არ აღმოიფხვრება PCR პროდუქტის დაბინძურება ექსპერიმენტის დაწყებამდე.

2: გაახანგრძლივეთ UV ექსპოზიციის დრო

news812 (2)

აღსანიშნავია, რომ დნმ-ის დაბინძურების მოსაშორებლად, რეგულარული ულტრაიისფერი გამოსხივება ჩვეულებრივზე 2 საათით უნდა გაგრძელდეს.მიუხედავად ამისა, ულტრაიისფერი გამოსხივების ეფექტი დნმ-ის დაბინძურების მცირე ფრაგმენტების (200bp ქვემოთ) მოცილებაზე ჯერ კიდევ არ არის კარგი.

ულტრაიისფერი ტალღის სიგრძე (ნმ) ზოგადად არის 254/300 ნმ და საკმარისია დასხივება 30 წუთის განმავლობაში.უნდა აღინიშნოს, რომ ულტრაიისფერი სხივების არჩევისას ნარჩენი PCR პროდუქტების დაბინძურების აღმოსაფხვრელად, გასათვალისწინებელია PCR პროდუქტის სიგრძე და ბაზების განაწილება პროდუქტის თანმიმდევრობით.ულტრაიისფერი გამოსხივება ეფექტურია მხოლოდ 500 bp-ზე მეტი გრძელი ფრაგმენტებისთვის და მცირე გავლენას ახდენს მოკლე ფრაგმენტებზე.

ულტრაიისფერი გამოსხივების დროს, PCR პროდუქტში პირმიდინის ფუძეები წარმოქმნიან დიმერებს.ამ დიმერებს შეუძლიათ შეწყვიტონ გაფართოება, მაგრამ დნმ-ის ჯაჭვის ყველა პირიმიდინს არ შეუძლია შექმნას დიმერები და ულტრაიისფერი გამოსხივება ასევე შეიძლება დაარღვიოს დიმერები..დიმერის წარმოქმნის ხარისხი დამოკიდებულია ულტრაიისფერი ტალღის სიგრძეზე, პირიმიდინის დიმერის ტიპზე და დიმერის უბნის მიმდებარე ნუკლეოტიდების თანმიმდევრობაზე.ამიტომ, თუ PCR გაძლიერებული ფრაგმენტები მცირეა, რეკომენდებულია UNG ანტი-PCR პროდუქტის დაბინძურების სისტემის გამოყენება.

3: ჩვეულებრივ გამოყენებული დნმ-ის დაბინძურების გამწმენდი

news812 (3)

აეროზოლები ადვილად წარმოიქმნება პიპეტების დამატებისას, რაც ძნელია თავიდან იქნას აცილებული და ის სწრაფად წყდება.ამიტომ, უდავოდ კარგი არჩევანია ხშირად გამოიყენოთ დნმ-ის დაბინძურების სპეციალური დამცავი საშუალებები დნმ-ის დაბინძურების გავრცელების თავიდან ასაცილებლად.

4: გამოიყენეთ UNG დაბინძურების საწინააღმდეგო სისტემა

news812 (4)

PCR პროდუქტის დაბინძურების მოხსნის შემდეგ, ტესტირების ლაბორატორიას შეუძლია გამოიყენოს UNG ანტი-PCR პროდუქტის დაბინძურების სისტემა, რათა თავიდან აიცილოს PCR პროდუქტის დაბინძურება.ზოგად ლაბორატორიებში შეგიძლიათ შეასრულოთ მარტივი ექსპერიმენტული ტიხრები, მკაცრად გამოყოთ PCR პროდუქტის არეალი სხვა უბნებისგან, დააწესოთ გარკვეული ლაბორატორიული წესები და რეგულაციები და ჩაატაროთ შესაბამისი ტრენინგი PCR პროდუქტის დაბინძურების თავიდან ასაცილებლად.

რეკომენდაციები: გონივრული PCR ლაბორატორიის შექმნა, კარგი PCR გარემოს შენარჩუნება, სტანდარტული PCR საოპერაციო პროცედურების ფორმულირება და ექსპერიმენტატორების მკაცრი საოპერაციო ცნობიერების ამაღლება არის PCR ექსპერიმენტების დაბინძურების პრევენციის ან შემცირების გასაღები.


გამოქვეყნების დრო: აგვისტო-12-2021