კვლავ იყენებთ ტრიზოლს რნმ-ის ამოსაღებად?
ხოდა, ნუ მადარდებ შენს ჯანმრთელობაზე!
ტრიზოლი მარგინალიზაციას აპირებს, არ მითხრათ ისევ სიბნელეში ხართ?

ტრიზოლის რეაგენტის ძირითადი კომპონენტია ფენოლი და ექსპერიმენტულ ოპერაციაში ასევე ემატება ორგანული რეაგენტები, როგორიცაა ქლოროფორმი.გრძელვადიანი ზემოქმედება ზიანს აყენებს თქვენს ჯანმრთელობას, განსაკუთრებით კანის პირდაპირ კონტაქტს შეუძლია გამოიწვიოს მძიმე ქიმიური დამწვრობა და მუდმივი ნაწიბურები.

ნორმალურ პირობებში, ლაბორატორიის პარტნიორებს შეუძლიათ შეამცირონ საფრთხე მხოლოდ სრულად შეიარაღებით (ლაბორატორიული ხალათების, ხელთათმანების და ნიღბების ტარება).

და ჩემი რჩევაა: გთხოვთ შეცვალოთ ტრიზოლი პირდაპირ, რათა თავიდან აიცილოთ ზიანი წყაროდან.

1. რნმ-ის ექსტრაქციის პირველი თაობის პროდუქტი
გამოვიდა 1987 წელს (ტრიზოლის რეაგენტები)

უპირატესობა:
უფრო სრული მოპოვება

ნაკლოვანებები:
საჭიროა ტოქსიკური რეაგენტები, როგორიცაა გუანიდინის იზოთიოციანატი-ფენოლ-ქლოროფორმი;
რთული ოპერაცია;
საჭიროა DNase-ის გამოყენება დნმ-ის დაბინძურების მოსაშორებლად

2.რნმ-ის ექსტრაქციის მეორე თაობის პროდუქტი
გამოდის 1994 წელს (QIAGEN RNeasy და ყველაზე შიდა პროდუქტები)

უპირატესობა:
მიღებულია სვეტის ცენტრიფუგა მეთოდი, რომელიც მარტივია;

მინუსი:
საჭიროა ცენტრიფუგა ქსოვილის ნარჩენების მოსაშორებლად
საჭიროა DNase-ის გამოყენება დნმ-ის დაბინძურების მოსაშორებლად

3.რნმ-ის ექსტრაქციის მესამე თაობის პროდუქტი
გამოდის 2005 წელს (QIAGEN RNeasy Plus და Fორეგენირნმ გამწმენდი სერიის პროდუქტები)

უპირატესობა:
უშუალოდ გამოიყენეთ დნმ-ის მოცილების სვეტი დნმ-ის და ქსოვილის ნამსხვრევების ერთდროულად მოსაშორებლად, რაც დაზოგავს დროსა და ძალისხმევას;
უსაფრთხო და მოსახერხებელი, არ არის საჭირო ფილტრის სვეტისა და DNase-ის დამატება, რათა ადვილად მოიცილოთ მინარევები და თავიდან აიცილოთ დნმ-ის დაბინძურება

მოდით შევხედოთ ოპერაციულ განსხვავებებს რნმ-ის ექსტრაქციის პირველი თაობის პროდუქტს (ტრიზოლი), მეორე თაობის პროდუქტს (RNeasy) და მესამე თაობის პროდუქტს (Foregene) შორის:

ფიგურაში მოქმედება ნათელია: მესამე თაობის პროდუქტს აშკარა უპირატესობები აქვს

მხოლოდ სამი სიტყვის აღსაწერად: მარტივი!Სწრაფი!Უსაფრთხოება

ექსპერიმენტული შედეგების PK სქემაამისთვისრნმ-ის ექსტრაქციის პირველი, მეორე და მესამე თაობის პროდუქტები:

1. Eელექტროფორეტოგრამა

პირველი თაობა (1: ტრიზოლი)
მეორე თაობა (2: QIAGEN RNeasy)
მესამე თაობა (3: QIAGEN RNeasy plus, 4: Foregene)

როგორი პროდუქტია კარგი, შედარებით გეცოდინებათ
რნმ ამოღებულია Foregene-ის ნაკრების გამოყენებით
არა მხოლოდ მაღალი კონცენტრაცია, არამედ კარგი მთლიანობა

2.qPCR გრაფიკი (გაძლიერების მრუდის გრაფიკი)

პირველი თაობა (ტრიზოლი)

მეორე თაობა (ცა ლურჯინიშნავსQIAGEN RNeasy-, წითელინიშნავსQIAGEN RNeasy +)

მესამე თაობა (ლურჯი ნიშნავს Foregene, მწვანე ნიშნავს QIAGEN RNeasy plus)

(შენიშვნა: qPCR გრაფიკის მეორე თაობის QIAGEN RNeasy ნიშნავს, რომ ნაკრები არ ამატებს DNase-ს და არ აშორებს დნმ-ის დაბინძურებას. ამიტომ, CT უფრო მაღალია და შედეგი არ არის ზუსტი; QIAGEN RNeasy + ნიშნავს, რომ დამატებულია DNase და დნმ-ის დაბინძურება ამოღებულია და შედეგი არის ზუსტი)

იქნება ეს ელექტროფორეტოგრამა თუ რაოდენობრივი PCR ამპლიფიკაციის მრუდის გრაფიკი, Foregene-ის პროდუქციის ხარისხი არ ჩამოუვარდება უცხოურ იმპორტირებულ პროდუქტებს.