W: ძმაო, საპირისპირო ტრანსკრიფცია დასრულდა და ბოლოს ბოლო ნაბიჯი - ფლუორესცენტური რაოდენობრივი PCR!ჰეი, ძმაო, რა არის რეალურ დროში რაოდენობრივი PCR?
M:PCR თქვენ ყოველთვის იცით, არა?
W: იცით, PCR არის პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქცია და ეს არის ტექნოლოგია, რომელიც ზრდის დნმ-ს!
M: თითქმის… ეს არის ტექნიკური მეთოდი სამიზნე მიმდევრობის გასაძლიერებლად მილიონზე მეტჯერ კონკრეტული პრაიმერების საშუალებით, მაგრამ ეს მხოლოდ მიუთითებს სამიზნე თანმიმდევრობის არსებობაზე ან არარსებობაზე და ვერ განსაზღვრავს საწყისი შაბლონის რაოდენობას.ფლუორესცენტური რაოდენობრივი PCR არის ტექნიკური მეთოდი, რომელიც შემუშავებულია ამ პრობლემის გადასაჭრელად.რეალურ დროში PCR და რაოდენობის PCR (qPCR) ზოგადად ეხება მას.
W: განსხვავება ჩვეულებრივი PCR-ისგან მდგომარეობს ფლუორესცენციის რაოდენობებში?
M: დიახ, ანუ, ყოველი PCR ციკლის გაფართოების ეტაპზე, გამოვლინდება ფლუორესცენციის სიგნალის ინტენსივობა და საწყისი შაბლონის რაოდენობა შეიძლება გამოითვალოს სიგნალის ინტენსივობის ცვლილების მიხედვით.
W: ეს ძალიან რთულია!ეს მე თვითონ უნდა გამოვთვალო?
M:ამისთვის საჭიროა ნელ-ნელა სწავლა, უმჯობესია, პრინციპის გაგება შეძლოთ.ახლა თქვენ შეგიძლიათ პირველ რიგში ფოკუსირება CT მნიშვნელობაზე, რომელიც შედარებით ინტუიციური ექსპერიმენტული მონაცემებია და მისი ზომა შეესაბამება საწყისი შაბლონის ოდენობის ზომას.ასევე არსებობს გრაფიკები, როგორიცაა გამაძლიერებელი მრუდები და დნობის მრუდები.მათ აქვთ საბოლოო სიტყვა იმის შესახებ, წარმატებულია თუ არა თქვენი ექსპერიმენტი.
W: ოჰ, ძმაო.შემდეგ მე ვაპირებ qPCR ექსპერიმენტის გაკეთებას!
M: განსაკუთრებული ყურადღება მიაქციეთ, რომ არ დაამატოთ შაბლონები რეაგენტის ზონაში, წინააღმდეგ შემთხვევაში თქვენი გამოუყენებელი ნარევი ადვილად დაბინძურდება!
W: მივხვდი!

რეალურ დროში PCR Easyᵀᴹ-SYBR Green I Kit

უფრო მაღალი ეფექტურობა, მეტი სპეციფიკა
მაღალი მგრძნობელობა, კარგი თავსებადობა