PCR-ის დაბადება
PCR (პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქცია)
პოლიმერაზული ჯაჭვური რეაქციის გამოგონებიდან 30 წელზე მეტი გავიდა.30 წელზე მეტი ხნის განმავლობაში, მას შემდეგ, რაც მრავალი მეცნიერი მთელს მსოფლიოში აგრძელებს დამატებას და გაუმჯობესებას, PCR ტექნოლოგია გახდა ყველაზე ფართოდ და ხშირად გამოყენებული და ყველაზე მნიშვნელოვანი ძირითადი კვლევის მეთოდი მთელი ცხოვრების მეცნიერებების სფეროში.
TouchDown PCR, Real-Time PCR, Multi PCR და ა.შ. შემუშავებული ტრადიციული PCR ტექნოლოგიის ფართო გამოყენების საფუძველზე, ისევე როგორც ახლად წარმოქმნილი ციფრული PCR (ციფრული PCR), მნიშვნელოვნად გაამდიდრა მეცნიერ მკვლევართა უმრავლესობის კვლევის მეთოდები და მნიშვნელოვნად დააჩქარა თანამედროვე ცხოვრების მეცნიერებების, განსაკუთრებით მოლეკულური ბიოლოგიის განვითარების პროცესი.
ტრადიციული PCR ტექნოლოგიის დეფექტები
ნუკლეინის მჟავების კომპლექსური გამოყოფა დამოპოვება:
★ ტრადიციული PCR ტექნოლოგია: საჭიროა
★ PCR მიღებული ტექნოლოგია: საჭიროა
★ დნმ-ისა და რნმ-ის ნიმუშები: დიდი განსხვავებები, რთული ოპერაციის მოთხოვნები
★ ორგანიზმის საფრთხეები: ტოქსიკური რეაგენტები აზიანებენ ორგანიზმს
ტრადიციული PCR ტექნოლოგია და წარმოებული ტექნოლოგია აქვს წინაპირობა - ნუკლეინის მჟავას გამოყოფა და გაწმენდა
ნებისმიერი ბიოლოგიური ნიმუში უნდა გაიაროს ნიმუშების რთული და დამღლელი დამუშავების სერია, რათა მიიღოთ ნუკლეინის მჟავის ნიმუშები, რომლებიც აკმაყოფილებენ PCR ტექნოლოგიის მოთხოვნებს.
დნმ-ისა და რნმ-ის გამოყოფა და მოპოვება ყოველთვის იყო ძირითადი ამოცანა, რომელიც შესაბამისმა მეცნიერმა მკვლევარებმა ყოველდღე უნდა გაიმეორონ.
ნიმუშებს შორის უზარმაზარი განსხვავებების გამო, დნმ-ისა და რნმ-ის გამოყოფის და ექსტრაქციის პროცესები ასევე ძალიან განსხვავებულია.ეს სამუშაო ოპერატორებისთვის მაღალ ტექნიკურ ცოდნას მოითხოვს.გამოყოფისა და ექსტრაქციის ტრადიციული ტექნიკა მოითხოვს ხანგრძლივ კონტაქტს ზოგიერთ უაღრესად ტოქსიკურ ქიმიურ რეაგენტთან.ეს გამოიწვევს ოპერატორის სხეულს შეუქცევად ზიანს, ექსპერიმენტის დროს კი პირდაპირ ზიანს მიაყენებს.
ამავდროულად, მათთვის, ვისაც აქვს დიდი რაოდენობის ნიმუშები შესასწავლად, ნუკლეინის მჟავების გამოყოფა და მოპოვება შრომატევადი ამოცანაა.
ნუკლეინის მჟავის იზოლაციისა და ექსტრაქციის ნაკრები ბაზარზე უკვე მომწიფებულია და ბევრი ბრენდია, მაგრამ ისინი დაახლოებით იგივეა.იქნება ეს სილიკა გელის მემბრანის სვეტის ცენტრიდანული ნაკრები თუ მაგნიტური მძივის მეთოდის ნაკრები, ამას დიდი დრო სჭირდება და ძვირი ღირს.ნაკრების ღირებულების გარდა, ასევე არსებობს სპეციალური მოთხოვნები ლაბორატორიულ აღჭურვილობაზე.ავტომატური სამუშაო სადგური, რომელიც გამოიყენება მაგნიტური მარცვლების მეთოდით, არის ძალიან ტიპიური ფართომასშტაბიანი მაღალი ღირებულების მოწყობილობა, რაც ლაბორატორიის დიდ ხარჯს წარმოადგენს.
ჯამში
PCR ექსპერიმენტების ჩატარებამდე ნიმუშების წინასწარი დამუშავება გარდაუვალი და ყოველთვის თავის ტკივილია მკვლევრებისთვის.როგორ მოვაგვაროთ ეს პრობლემა და შეიძლება თუ არა PCR ექსპერიმენტების ჩატარება ნუკლეინის მჟავების გამოყოფისა და ექსტრაქციის გარეშე, ყოველთვის ფიქრობდა მეცნიერ მკვლევართა და კლინიკური ლაბორატორიის პერსონალის უმრავლესობისთვის.
Foregene-ის გადაწყვეტა
Direct PCR ტექნოლოგიისა და მასთან დაკავშირებული კომპლექტების მრავალწლიანი შრომატევადი კვლევის შემდეგ, Forgene-მა წარმატებით გაარღვია მრავალი შეფერხება და წარმატებით მიაღწია პირდაპირი PCR მრავალი ტიპის სხვადასხვა ნიმუშს ძლიერი გამძლეობითა და ადაპტირებით, რაც მკვლევარებს საშუალებას აძლევდა დაეღწიათ ნუკლეინის მჟავების უხერხული და საშიში გამოყოფისა და ექსტრაქციისგან.ეს მნიშვნელოვნად შეამცირებს ყველას შრომის ინტენსივობას, დააჩქარებს ექსპერიმენტის პროცესს და დაზოგავს სამეცნიერო კვლევისა და ტესტირების ხარჯებს.
Forgene-ის გაგება და ცოდნა DirectPCR-ის შესახებ
პირველი, DirectPCR ტექნოლოგია არის პირდაპირი PCR ტექნოლოგია სხვადასხვა ბიოლოგიური ნიმუშის ქსოვილებისთვის.ამ ტექნიკურ პირობებში არ არის საჭირო ნუკლეინის მჟავების გამოყოფა და ამოღება და ქსოვილის ნიმუში უშუალოდ გამოიყენება როგორც ობიექტი, ხოლო სამიზნე გენის პრაიმერები ემატება PCR რეაქციისთვის.
მეორე, DirectPCR ტექნოლოგია არ არის მხოლოდ დნმ-ის შაბლონის გაძლიერების ტრადიციული ტექნოლოგია, არამედ მოიცავს რნმ შაბლონის საპირისპირო ტრანსკრიფციის PCR-ს.
მესამე, DirectPCR ტექნოლოგია არა მხოლოდ უშუალოდ ახორციელებს რუტინულ ხარისხობრივ PCR რეაქციებს ქსოვილის ნიმუშებზე, არამედ მოიცავს რეალურ დროში qPCR რეაქციებს, რაც მოითხოვს რეაქციის სისტემას ჰქონდეს ძლიერი უნარი წინააღმდეგობის გაწევის ფონური ფლუორესცენციის ჩარევისა და ენდოგენური ფლუორესცენციის ჩაქრობის ანტაგონიზაციისთვის.
მეოთხე, DirectPCR ტექნოლოგიით გამიზნული ქსოვილის ნიმუშები საჭიროებს მხოლოდ ნუკლეინის მჟავას შაბლონების განთავისუფლებას და არ აშორებს ცილებს, პოლისაქარიდებს, მარილის იონებს და ა.შ., რომლებიც ხელს უშლიან PCR რეაქციას.ეს მოითხოვს ნუკლეინის მჟავას პოლიმერაზას და PCR Mix-ს რეაქციის სისტემაში, რათა ჰქონდეს შესანიშნავი ანტი-შექცევადობა და ადაპტირება, და შეუძლია უზრუნველყოს ფერმენტის აქტივობა და რეპლიკაციის სიზუსტე რთულ პირობებში.
მეხუთე, DirectPCR ტექნოლოგიით გამიზნული ქსოვილის ნიმუშები არ ექვემდებარება ნუკლეინის მჟავას გამდიდრების დამუშავებას და შაბლონის რაოდენობა ძალიან მცირეა, რაც მოითხოვს რეაქციის სისტემის უკიდურესად მაღალ მგრძნობელობას და გაძლიერების ეფექტურობას.
დასკვნა
DirectPCR ტექნოლოგია ერთ-ერთი ყველაზე მნიშვნელოვანი ტექნოლოგიური განვითარება და ინოვაციაა ბოლო 30 წლის განმავლობაში PCR ტექნოლოგიის დაბადებიდან.Forgene იყო და იქნება ამ ტექნოლოგიის პიონერი და ნოვატორი.
DirectPCR ტექნოლოგიის გამოყენების პერსპექტივა ძალიან ფართოა.ამ ტექნოლოგიის მუდმივი გაუმჯობესება და პოპულარიზაცია აუცილებლად მოიტანს დივერსიულ ცვლილებებს სამეცნიერო კვლევებსა და ინსპექტირების სამუშაოებში.ეს არის PCR ტექნოლოგიის რევოლუცია.
გამოქვეყნების დრო: თებ-21-2017
