ცხელი დაწყების Taq ფერმენტი ფართოდ გამოიყენება.ჩვეულებრივ დნმ პოლიმერაზასთან შედარებით, ცხელი დაწყების Taq ფერმენტს შეუძლია ეფექტურად აიცილოს არასპეციფიკური გაძლიერება და პრაიმერის დიმერების წარმოქმნა და ეფექტურად გააუმჯობესოს სამიზნე გენის ამპლიფიკაციის წარმატების მაჩვენებელი.განსაკუთრებით გენეტიკური ტესტირების სფეროში, ცხელი დაწყების Taq ფერმენტი გამოვლინდა, როგორც სავალდებულო სტანდარტი ინდუსტრიაში და ჩვეულებრივი დნმ პოლიმერაზა არ უნდა იქნას გამოყენებული.როგორც ზემოაღნიშნულიდან ჩანს, ცხელი დაწყების Taq ფერმენტები ფართოდ გამოიყენება.ამჟამად, შიდა ბაზარზე არის მრავალი ბრენდის Hot-Start Taq ფერმენტები, მაგრამ არ არის ბევრი ცხელი დაწყების Taq ფერმენტი მაღალი ხარისხის.ამდენი ცხელი დაწყების Taq ფერმენტის პროდუქტის წინაშე როგორ უნდა ავირჩიოთ?

1. აირჩიეთ ცხელი დაწყების Taq ფერმენტი მაღალი გამაძლიერებელი ეფექტურობით

PCR გაძლიერების ეფექტურობა მჭიდრო კავშირშია Taq ფერმენტის მუშაობასთან.კარგი Taq ფერმენტული რეაქციის სისტემის ოპტიმიზების შემდეგ, ამპლიფიკაციის ეფექტურობა 95%-ზე მეტია და საწყისი შაბლონის რაოდენობის გამაძლიერებელი დიაპაზონი ფართოა.დამაკმაყოფილებელი ამპლიფიკაციის მიღება შესაძლებელია, როდესაც სამიზნე გენის შემცველობა დაბალია და ადვილი არ არის მოწამვლა, როდესაც შაბლონის რაოდენობა მაღალია და ექსპონენციალური გაძლიერების პერიოდი გრძელია.Taq ფერმენტისთვის ცუდი ეფექტურობით, მაშინაც კი, თუ რეაქციის სისტემა მრავალჯერ ოპტიმიზირებულია, ამპლიფიკაციის ეფექტურობა მაინც 90%-ზე ნაკლებია, გამაძლიერებელი მრუდის "S" ფორმა არ არის აშკარა, დახრილობა მცირეა და მრუდი ბრტყელია.როდესაც შაბლონის რაოდენობა დაბალია, მისი გაძლიერება შეუძლებელია, ხოლო როდესაც შაბლონის რაოდენობა მაღალია, გამაძლიერებელი ეფექტი იდეალური არ არის.ამიტომ, დნმ პოლიმერაზების შერჩევა მაღალი ამპლიფიკაციის ეფექტურობით არის გადამწყვეტი მნიშვნელობა PCR და qPCR წარმატებისთვის.

2. აირჩიეთ ცხელი დაწყების Taq ფერმენტი ძლიერი ფერმენტის სიმძლავრით

Taq ფერმენტის ფერმენტული ძალა დაკავშირებულია ამპლიფიკაციის ეფექტურობასთან.ზოგადად, რაც უფრო ძლიერია ცხელი დაწყების Taq ფერმენტის ფერმენტული სიმძლავრე, მით უფრო გრძელია PCR გაძლიერების ექსპონენციალური ზრდის პერიოდი, მით უფრო ტიპიურია „S- ფორმის“ მრუდი, მით უფრო მაღალია ფლუორესცენციის სიგნალის მნიშვნელობა და უფრო შესაფერისია მულტიპლექსური PCR გამოვლენისთვის.სუსტი ფერმენტული სიმძლავრის მქონე ბრენდის დნმ პოლიმერაზებს შეუძლიათ მხოლოდ 2-პლექსის რეაქციების მხარდაჭერა.3-პლექს რეაქციების შესრულებისას, გამაძლიერებელი მრუდი დაბალია, ფლუორესცენციის სიგნალის მნიშვნელობა დაბალია და არ არსებობს ტიპიური გამაძლიერებელი მრუდი, ამიტომ შედეგების შეფასება რთულია.

3. აირჩიეთ ცხელი დაწყების Taq ფერმენტი მაღალი მგრძნობელობით

ზოგადად, დნმ პოლიმერაზას აქვს მაღალი გამაძლიერებელი ეფექტურობა და მაღალი მგრძნობელობა, მაგრამ ასევე არის შეუსაბამობები.თუ გასაძლიერებელი ნიმუშის სამიზნე გენის სიმრავლე დაბალია, რეკომენდებულია Taq ფერმენტის ამპლიფიკაციის მგრძნობელობის ტესტირება.გამოვლენის ყველაზე გავრცელებული მეთოდია სამიზნე გენის პლაზმიდის ფრაგმენტის 10-ჯერ ან 5-ჯერ გრადიენტური განზავების ჩატარება, ქვედა განზავებისას PCR გამოვლენის ჩატარება და უფრო მაღალი აღმოჩენის მგრძნობელობის მქონე ცხელი დაწყების Taq ფერმენტის შერჩევა.

ზემოაღნიშნულიდან ჩანს, რომ მკვლევარებმა უნდა აირჩიონ საკუთარი ექსპერიმენტული მოთხოვნებისა და დაფინანსების პირობების მიხედვით.უმჯობესია ჩაატაროთ გრადიენტური განზავების გამაძლიერებელი ექსპერიმენტი, რათა აღმოაჩინოს გამაძლიერებელი ეფექტურობა და მგრძნობელობა ცხელი დაწყების Taq ფერმენტის.

Foregene-ის მაგალითი's Taq დნმ პოლიმერაზა:

Foreasy HS Taq დნმ პოლიმერაზა

აღწერა

Foreasy HS Taq დნმ პოლიმერაზა არის დნმ პოლიმერაზა, რომელიც გამოხატულია Escherichia coli-ს საინჟინრო ბაქტერიებში გენის რეკომბინაციის ტექნოლოგიით.ფერმენტი შერწყმულია უნიკალურ რეაქციის ბუფერთან, რაც პროდუქტს უაღრესად რეზისტენტულ და თავსებადობას ხდის და შეუძლია უშუალოდ გამოიყენოს ნიმუში ლიზატი (Foregene Lysis სისტემა), როგორც შაბლონი გამოვლენის რეაქციებისთვის.

განაცხადი

გასუფთავებული შაბლონების და არაგასუფთავებული შაბლონების ხარისხობრივი PCR და რაოდენობრივი PCR გამოვლენა.

Ხარისხის კონტროლი

1. არ არის გამოვლენილი ეგზოგენური ნუკლეაზას აქტივობა

2.PCR მეთოდი ნარჩენი გენომიური დნმ-ის აღმოსაჩენად მასპინძლის გარეშე

3. მას შეუძლია ეფექტურად გააძლიეროს ერთი ასლი გენები ადამიანის გენომში

4. შეინახეთ ოთახის ტემპერატურაზე ერთი კვირის განმავლობაში, აქტივობის აშკარა ცვლილებები

პროდუქტის დეტალები: https://www.foreivd.com/foreasy-hs-taq-dna-polymerase-product/