ორგანიზაცია აგრძელებს პროცედურის კონცეფციას „მეცნიერული მენეჯმენტი, მაღალი ხარისხისა და ეფექტურობის პრიმატი, მყიდველი უზენაესი ჩინეთისთვის. მწარმოებელი 2× კონცენტრირებული პრემიქსისთვის Unpurified Sample Real-Time Quantitative PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, ჩვენი ბიზნესი ეძღვნება მომხმარებელს მნიშვნელოვანი და უსაფრთხო უმაღლესი ხარისხის პროდუქტების მიწოდებას, ყოველი ჩვენი მომხმარებლის აგრესიული მომსახურებით.
ორგანიზაცია აგრძელებს პროცედურის კონცეფციას „მეცნიერული მენეჯმენტი, მაღალი ხარისხის და ეფექტურობის პრიმატი, მყიდველის უმაღლესიChina Taq დნმ პოლიმერაზა და Qpcrჩვენს კომპანიას აქვს დიდი ძალა და გააჩნია სტაბილური და სრულყოფილი გაყიდვების ქსელის სისტემა.ჩვენ გვსურს, რომ შეგვეძლოს კარგი საქმიანი ურთიერთობების დამყარება ყველა მომხმარებელთან სახლში და საზღვარგარეთიდან ორმხრივი სარგებლის საფუძველზე.
რეალურ დროში PCR პრაიმერის დიზაინის პრინციპები

Forward Primer და Reverse Primer

Real Time PCR-სთვის პრაიმერის დიზაინი ძალიან მნიშვნელოვანია.პრაიმერები დაკავშირებულია PCR გაძლიერების სპეციფიკასთან და ეფექტურობასთან და შეიძლება შეიქმნას შემდეგი პრინციპების მიხედვით:

• პრაიმერის სიგრძე: 18-30bp.
• GC შემცველობა: 40-60%.
• Tm მნიშვნელობა: პრაიმერის დიზაინის პროგრამულ უზრუნველყოფას, როგორიცაა Primer 5, შეუძლია პრაიმერის Tm მნიშვნელობა მისცეს.ზედა და ქვედა დინების პრაიმერების Tm მნიშვნელობები უნდა იყოს რაც შეიძლება ახლოს.ასევე შეიძლება გამოყენებულ იქნას Tm გამოთვლის ფორმულა: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR-ის ჩატარებისას, პრაიმერის Tm მნიშვნელობის 5 °C-ზე დაბალი ტემპერატურა, როგორც წესი, შეირჩევა ანეილირების ტემპერატურად (შედუღების ტემპერატურის შესაბამისმა ზრდამ შეიძლება გაზარდოს PCR რეაქციის სპეციფიკა).
• პრაიმერი და PCR პროდუქტები:

1. დიზაინის პრაიმერის PCR გამაძლიერებელი პროდუქტის სიგრძე სასურველია იყოს 100-150bp.
2. შეძლებისდაგვარად თავიდან უნდა იქნას აცილებული დიზაინის პრაიმერები შაბლონის მეორად სტრუქტურულ ზონაში.
3. მოერიდეთ 2 ან მეტი დამატებითი ფუძის წარმოქმნას ზედა და ქვედა დინების პრაიმერების 3' ბოლოებს შორის.
4. პრაიმერის 3' ტერმინალის ბაზა არ შეიძლება იყოს 3 დამატებითი თანმიმდევრული G ან C.
5. თავად პრაიმერებს არ შეიძლება ჰქონდეთ დამატებითი სტრუქტურები, წინააღმდეგ შემთხვევაში წარმოიქმნება თმის სამაგრი სტრუქტურა, რაც გავლენას მოახდენს PCR გაძლიერებაზე.
6. ATCG უნდა განაწილდეს რაც შეიძლება თანაბრად პრაიმერის თანმიმდევრობით და 3' ტერმინალური ბაზა თავიდან უნდა იქნას აცილებული, როგორც T.

დანართი1: Cell პირდაპირიRT-qPCR ნაკრების კომპონენტიt დანამატის პაკეტი

1.უჯრედის ლიზისის ხსნარი

 ორგანიზაცია აგრძელებს პროცედურის კონცეფციას „მეცნიერული მენეჯმენტი, მაღალი ხარისხისა და ეფექტურობის პრიმატი, მყიდველი უზენაესი ჩინეთისთვის. მწარმოებელი 2× კონცენტრირებული პრემიქსისთვის Unpurified Sample Real-Time Quantitative PCR Direct Multiplex Probe Qpcr Mix Plus U, ჩვენი ბიზნესი ეძღვნება მომხმარებელს მნიშვნელოვანი და უსაფრთხო უმაღლესი ხარისხის პროდუქტების მიწოდებას, ყოველი ჩვენი მომხმარებლის აგრესიული მომსახურებით.
ჩინეთის მწარმოებელი ამისთვისChina Taq დნმ პოლიმერაზა და Qpcrჩვენს კომპანიას აქვს დიდი ძალა და გააჩნია სტაბილური და სრულყოფილი გაყიდვების ქსელის სისტემა.ჩვენ გვსურს, რომ შეგვეძლოს კარგი საქმიანი ურთიერთობების დამყარება ყველა მომხმარებელთან სახლში და საზღვარგარეთიდან ორმხრივი სარგებლის საფუძველზე.

რეალურ დროში PCR პრაიმერის დიზაინის პრინციპები

Forward Primer და Reverse Primer

Real Time PCR-სთვის პრაიმერის დიზაინი ძალიან მნიშვნელოვანია.პრაიმერები დაკავშირებულია PCR გაძლიერების სპეციფიკასთან და ეფექტურობასთან და შეიძლება შეიქმნას შემდეგი პრინციპების მიხედვით:

• პრაიმერის სიგრძე: 18-30bp.
• GC შემცველობა: 40-60%.
• Tm მნიშვნელობა: პრაიმერის დიზაინის პროგრამულ უზრუნველყოფას, როგორიცაა Primer 5, შეუძლია პრაიმერის Tm მნიშვნელობა მისცეს.ზედა და ქვედა დინების პრაიმერების Tm მნიშვნელობები უნდა იყოს რაც შეიძლება ახლოს.ასევე შეიძლება გამოყენებულ იქნას Tm გამოთვლის ფორმულა: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR-ის ჩატარებისას, პრაიმერის Tm მნიშვნელობის 5 °C-ზე დაბალი ტემპერატურა, როგორც წესი, შეირჩევა ანეილირების ტემპერატურად (შედუღების ტემპერატურის შესაბამისმა ზრდამ შეიძლება გაზარდოს PCR რეაქციის სპეციფიკა).
• პრაიმერი და PCR პროდუქტები:

1. დიზაინის პრაიმერის PCR გამაძლიერებელი პროდუქტის სიგრძე სასურველია იყოს 100-150bp.
2. შეძლებისდაგვარად თავიდან უნდა იქნას აცილებული დიზაინის პრაიმერები შაბლონის მეორად სტრუქტურულ ზონაში.
3. მოერიდეთ 2 ან მეტი დამატებითი ფუძის წარმოქმნას ზედა და ქვედა დინების პრაიმერების 3' ბოლოებს შორის.
4. პრაიმერის 3' ტერმინალის ბაზა არ შეიძლება იყოს 3 დამატებითი თანმიმდევრული G ან C.
5. თავად პრაიმერებს არ შეიძლება ჰქონდეთ დამატებითი სტრუქტურები, წინააღმდეგ შემთხვევაში წარმოიქმნება თმის სამაგრი სტრუქტურა, რაც გავლენას მოახდენს PCR გაძლიერებაზე.
6. ATCG უნდა განაწილდეს რაც შეიძლება თანაბრად პრაიმერის თანმიმდევრობით და 3' ტერმინალური ბაზა თავიდან უნდა იქნას აცილებული, როგორც T.

დანართი1: Cell პირდაპირიRT-qPCR ნაკრების კომპონენტიt დანამატის პაკეტი

1.უჯრედის ლიზისის ხსნარი

ინსტრუქციის სახელმძღვანელოები:

 Quick Easy Cell Direct RT-qPCR Kit-Taqman