page_banner

Cell Direct RT qPCR ნაკრები - SYBR GREEN I

ნაკრების აღწერა:

◮ მარტივი და ეფექტური: Cell Direct RT ტექნოლოგიით, რნმ-ის ნიმუშების მიღება შესაძლებელია მხოლოდ 7 წუთში.

ნიმუშის მოთხოვნა მცირეა, შესაძლებელია 10 უჯრედის ტესტირება.

◮მაღალი გამტარუნარიანობა: მას შეუძლია სწრაფად აღმოაჩინოს რნმ 384, 96, 24, 12, 6 ჭაბურღილის ფირფიტებში გაშენებულ უჯრედებში.

დნმ-ის საშლელს შეუძლია სწრაფად ამოიღოს გამოთავისუფლებული გენომები, მნიშვნელოვნად შეამციროს გავლენა შემდგომ ექსპერიმენტულ შედეგებზე.

ოპტიმიზებული RT და qPCR სისტემა ხდის ორეტაპიან RT-PCR საპირისპირო ტრანსკრიფციას უფრო ეფექტურს და PCR-ს უფრო სპეციფიკურს და უფრო გამძლეს RT-qPCR რეაქციის ინჰიბიტორების მიმართ.

foregene strength


პროდუქტის დეტალი

პროდუქტის ტეგები

ხშირად დასმული კითხვები

აღწერილობები

ეს ნაკრები იყენებს უნიკალურ ლიზის ბუფერულ სისტემას, რომელსაც შეუძლია სწრაფად გაათავისუფლოს რნმ კულტივირებული უჯრედის ნიმუშებიდან RT-qPCR რეაქციებისთვის, რითაც აღმოფხვრის რნმ-ის გაწმენდის დროს შრომატევადი და შრომატევადი პროცესი.რნმ-ის შაბლონის მიღება შესაძლებელია სულ რაღაც 7 წუთში.5×პირდაპირი RT Mix და 2×პირდაპირი qPCR Mix-SYBR რეაგენტები, რომლებიც უზრუნველყოფილია ნაკრებით, შეუძლიათ სწრაფად და ეფექტურად მიიღონ რეალურ დროში რაოდენობრივი PCR შედეგები.

5×პირდაპირი RT Mix და 2×პირდაპირი qPCR Mix-SYBR აქვს ძლიერი ინჰიბიტორების ტოლერანტობა და ნიმუშების ლიზატი შეიძლება გამოყენებულ იქნას როგორც შაბლონი პირდაპირ RT-qPCR-სთვის.ეს ნაკრები შეიცავს უნიკალურ რნმ-ს მაღალი აფინურობის Foregene საპირისპირო ტრანსკრიპტაზას და Hot D-Taq დნმ პოლიმერაზას, dNTPs, MgCl2, რეაქციის ბუფერი, PCR ოპტიმიზატორი და სტაბილიზატორი.

სპეციფიკაციები

200×20μლ Rxns, 1000×20μლ Rxns

ნაკრების კომპონენტები

ნაწილი I

ბუფერი CL

Foregene Protease Plus II

ბუფერი ST

ნაწილი II

დნმ-ის საშლელი

5× პირდაპირი RT Mix

2× Direct qPCR Mix-SYBR

50× ROX Reference საღებავი

RNase-ის გარეშე ddH2O

ინსტრუქციები

მახასიათებლები და უპირატესობები

მარტივი და ეფექტური: Cell Direct RT ტექნოლოგიით, რნმ-ის ნიმუშების მიღება შესაძლებელია მხოლოდ 7 წუთში.

■ ნიმუშის მოთხოვნა მცირეა, შესაძლებელია 10 უჯრედის ტესტირება.

■ მაღალი გამტარუნარიანობა: მას შეუძლია სწრაფად აღმოაჩინოს რნმ უჯრედებში, რომლებიც კულტივირებულია 384, 96, 24, 12, 6 ჭაბურღილ ფირფიტებში.

■ დნმ-ის საშლელს შეუძლია სწრაფად ამოიღოს გამოთავისუფლებული გენომები, მნიშვნელოვნად შეამციროს გავლენა შემდგომ ექსპერიმენტულ შედეგებზე.

■ ოპტიმიზებული RT და qPCR სისტემა ხდის ორეტაპიან RT-PCR საპირისპირო ტრანსკრიფციას უფრო ეფექტურს და PCR-ს უფრო სპეციფიკურს და უფრო გამძლეს RT-qPCR რეაქციის ინჰიბიტორების მიმართ.

ნაკრების აპლიკაცია

გამოყენების სფერო: კულტივირებული უჯრედები.

- ნიმუშის ლიზისით გამოთავისუფლებული რნმ: გამოიყენება მხოლოდ ამ ნაკრების RT-qPCR შაბლონზე.

- ნაკრების გამოყენება შესაძლებელია შემდეგი მიზნებისთვის: გენის ექსპრესიის ანალიზი, siRNA-ს შუამავლობით გენის გამაჩუმებელი ეფექტის შემოწმება, წამლების სკრინინგი და ა.შ.

დიაგრამა

Cell Direct RT qPCR diagram

შენახვა და შენახვის ვადა

ამ ნაკრების I ნაწილი უნდა ინახებოდეს 4℃ ტემპერატურაზე;II ნაწილი უნდა ინახებოდეს -20℃ ტემპერატურაზე.

 Foregene Protease Plus II უნდა ინახებოდეს 4-ზე℃, არ გაყინოთ -20℃.

 რეაგენტი 2×Direct qPCR Mix-SYBR უნდა ინახებოდეს -20-ზესიბნელეში;თუ ხშირად გამოიყენება, მისი შენახვა შესაძლებელია 4-ზეც℃ მოკლევადიანი შენახვისთვის (გამოიყენება 10 დღის განმავლობაში).


  • წინა:
  • შემდეგი:

  • რეალურ დროში PCR პრაიმერის დიზაინის პრინციპები

    Forward Primer და Reverse Primer

    Real Time PCR-სთვის პრაიმერის დიზაინი ძალიან მნიშვნელოვანია.პრაიმერები დაკავშირებულია PCR გაძლიერების სპეციფიკასთან და ეფექტურობასთან და შეიძლება შეიქმნას შემდეგი პრინციპების მიხედვით:

    პრაიმერის სიგრძე: 18-30bp.

    GC შემცველობა: 40-60%.

    Tm მნიშვნელობა: პრაიმერის დიზაინის პროგრამულ უზრუნველყოფას, როგორიცაა Primer 5, შეუძლია მისცეს პრაიმერის Tm მნიშვნელობა.ზედა და ქვედა დინების პრაიმერების Tm მნიშვნელობები მაქსიმალურად ახლოს უნდა იყოს.ასევე შეიძლება გამოყენებულ იქნას Tm გაანგარიშების ფორმულა: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR-ის ჩატარებისას, პრაიმერის Tm მნიშვნელობის 5 °C-ზე დაბალი ტემპერატურა, როგორც წესი, შეირჩევა ანეილირების ტემპერატურად (შედუღების ტემპერატურის შესაბამისმა ზრდამ შეიძლება გაზარდოს PCR რეაქციის სპეციფიკა).

    პრაიმერები და PCR პროდუქტები:

    დიზაინის პრაიმერის PCR გამაძლიერებელი პროდუქტის სიგრძე სასურველია იყოს 100-150bp.

    შეძლებისდაგვარად თავიდან უნდა იქნას აცილებული დიზაინის პრაიმერები შაბლონის მეორად სტრუქტურულ ზონაში.

    მოერიდეთ 2 ან მეტი დამატებითი ფუძის წარმოქმნას ზედა და ქვედა დინების პრაიმერების 3' ბოლოებს შორის.

    პრაიმერის 3' ტერმინალური ბაზა არ შეიძლება იყოს 3 დამატებითი თანმიმდევრული G ან C.

    თავად პრაიმერებს არ შეიძლება ჰქონდეთ დამატებითი სტრუქტურები, წინააღმდეგ შემთხვევაში წარმოიქმნება თმის სამაგრი სტრუქტურა, რაც გავლენას მოახდენს PCR გაძლიერებაზე.

    ATCG უნდა განაწილდეს რაც შეიძლება თანაბრად პრაიმერის თანმიმდევრობით და 3' ტერმინალური ბაზა თავიდან უნდა იქნას აცილებული, როგორც T.

    დანართი 1: Cell Direct RT-qPCR Kit კომპონენტის დანამატის პაკეტი

    1.უჯრედის ლიზისის ხსნარი


    უჯრედის ლიზისის ხსნარი

    ნაკრების კომპონენტები

    (24 ჭაბურღილის ლიზის სისტემა / ჭა)

    DRT-01011-A1

    DRT-01011-A2

    100 ტ

    500 ტ

    ნაწილიმე

    ბუფერი CL

    20 მლ

    100 მლ

    Foregene Protease Plus II

    400 მლ

    1 მლ × 2

    ბუფერი ST

    1 მლ × 2

    10 მლ

    ნაწილიII

    დნმ-ის საშლელი

    400 მლ

    1 მლ × 2

    2.RT Mix


    RT მიქსი

    ნაკრების კომპონენტები

    (20 მლ რეაქციის სისტემა)

    DRT-01011-B1

    200 ტ

    5× პირდაპირი RT Mix

    800 მლ

    RNase-ის გარეშე ddH2O

    1.7 მლ × 2

     

    3.qPCR Mix


    qPCR Mix

    ნაკრების კომპონენტები

    (20 მლ რეაქციის სისტემა)

    DRT-01011-C1

    DRT-01011-C2

    200 ტ

    1000 ტ

    2× Direct qPCR Mix-SYBR

    1 მლ × 2

    1.7 მლ × 6

    50× ROX Reference საღებავი

    40 მლ

    200 მლ

    RNase-ის გარეშე ddH2O

    1,7 მლ

    10 მლ

    დაწერეთ თქვენი მესიჯი აქ და გამოგვიგზავნეთ

    დაკავშირებულიპროდუქტები