OEM Factory მაღალი სიზუსტის Rt-Qpcr 2X ერთსაფეხურიანი Multiplex Master Mix-ისთვის
შესანიშნავი დასაწყისისთვის და Consumer Supreme არის ჩვენი სახელმძღვანელო, რათა მივაწოდოთ საუკეთესო სერვისები ჩვენს მყიდველებს. ამ დღეებში, ჩვენ მაქსიმალურად ვცდილობთ ვიყოთ ჩვენი ინდუსტრიის საუკეთესო ექსპორტიორებს შორის, რათა დავაკმაყოფილოთ მყიდველები OEM Factory for High Fidelity Rt-Qpcr 2X One-Step Multiplex Master Mix, გპირდებით, რომ მოგაწოდოთ ჩვენი უმაღლესი ხარისხის ეკონომიური პროდუქტები და მოგაწოდოთ უმაღლესი ხარისხის მომსახურება.
შესანიშნავი დასაწყისისთვის, და Consumer Supreme არის ჩვენი სახელმძღვანელო, რათა მივაწოდოთ საუკეთესო სერვისები ჩვენს მყიდველებს. ამ დღეებში, ჩვენ მაქსიმალურად ვცდილობთ ვიყოთ ჩვენი ინდუსტრიის საუკეთესო ექსპორტიორებს შორის, რათა დავაკმაყოფილოთ მყიდველების მეტი საჭიროება.China Taq დნმ პოლიმერაზა და Qpcrუმაღლესი და განსაკუთრებული სერვისით, ჩვენ კარგად განვითარებულები ვართ ჩვენს მომხმარებლებთან ერთად.ექსპერტიზა და ნოუ-ჰაუ უზრუნველყოფს, რომ ჩვენ ყოველთვის ვსარგებლობთ ჩვენი მომხმარებლების ნდობით ჩვენს ბიზნეს საქმიანობაში."ხარისხი", "პატიოსნება" და "მომსახურება" ჩვენი პრინციპია.ჩვენი ერთგულება და ვალდებულებები პატივისცემით რჩება თქვენს სამსახურში.დაგვიკავშირდით დღეს დამატებითი ინფორმაციისთვის დაგვიკავშირდით ახლავე.
რეალურ დროში PCR პრაიმერის დიზაინის პრინციპები
Forward Primer და Reverse Primer
Real Time PCR-სთვის პრაიმერის დიზაინი ძალიან მნიშვნელოვანია.პრაიმერები დაკავშირებულია PCR გაძლიერების სპეციფიკასთან და ეფექტურობასთან და შეიძლება შეიქმნას შემდეგი პრინციპების მიხედვით:
- პრაიმერის სიგრძე: 18-30bp.
- GC შემცველობა: 40-60%.
- Tm მნიშვნელობა: პრაიმერის დიზაინის პროგრამულ უზრუნველყოფას, როგორიცაა Primer 5, შეუძლია პრაიმერის Tm მნიშვნელობა მისცეს.ზედა და ქვედა დინების პრაიმერების Tm მნიშვნელობები უნდა იყოს რაც შეიძლება ახლოს.ასევე შეიძლება გამოყენებულ იქნას Tm გამოთვლის ფორმულა: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR-ის ჩატარებისას, პრაიმერის Tm მნიშვნელობის 5 °C-ზე დაბალი ტემპერატურა, როგორც წესი, შეირჩევა ანეილირების ტემპერატურად (შედუღების ტემპერატურის შესაბამისმა ზრდამ შეიძლება გაზარდოს PCR რეაქციის სპეციფიკა).
- პრაიმერი და PCR პროდუქტები:
- დიზაინის პრაიმერის PCR გამაძლიერებელი პროდუქტის სიგრძე სასურველია იყოს 100-150bp.
- შეძლებისდაგვარად თავიდან უნდა იქნას აცილებული დიზაინის პრაიმერები შაბლონის მეორად სტრუქტურულ ზონაში.
- მოერიდეთ 2 ან მეტი დამატებითი ფუძის წარმოქმნას ზედა და ქვედა დინების პრაიმერების 3' ბოლოებს შორის.
- პრაიმერის 3' ტერმინალის ბაზა არ შეიძლება იყოს 3 დამატებითი თანმიმდევრული G ან C.
- თავად პრაიმერებს არ შეიძლება ჰქონდეთ დამატებითი სტრუქტურები, წინააღმდეგ შემთხვევაში წარმოიქმნება თმის სამაგრი სტრუქტურა, რაც გავლენას მოახდენს PCR გაძლიერებაზე.
- ATCG უნდა განაწილდეს რაც შეიძლება თანაბრად პრაიმერის თანმიმდევრობით და 3' ტერმინალური ბაზა თავიდან უნდა იქნას აცილებული, როგორც T.
დანართი1: Cell პირდაპირიRT-qPCR ნაკრების კომპონენტიt დანამატის პაკეტი
1.უჯრედის ლიზისის ხსნარი
უჯრედის ლიზისის ხსნარი | |||
ნაკრების კომპონენტები (24 ჭაბურღილის ლიზის სისტემა / ჭა) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 ტ | 500 ტ | ||
ნაწილიმე | ბუფერი CL | 20 მლ | 100 მლ |
Foregene Protease Plus II | 400 მლ | 1 მლ × 2 | |
ბუფერი ST | 1 მლ × 2 | 10 მლ | |
ნაწილიII | დნმ-ის საშლელი | 400 მლ | 1 მლ × 2 |
RT მიქსი | |
ნაკრების კომპონენტები (20 მლ რეაქციის სისტემა) | DRT-01011-B1 |
200 ტ | |
5× პირდაპირი RT მიქსი | 800 მლ |
RNase-ის გარეშე ddH2O | 1.7 მლ × 2 |
qPCR Mix | ||
ნაკრების კომპონენტები (20 მლ რეაქციის სისტემა) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 ტ | 1000 ტ | |
2× პირდაპირი qPCR Mix-Taqman | 1 მლ × 2 | 1.7 მლ × 6 |
20× ROX Reference საღებავი | 40 მლ | 200 მლ |
RNase-ის გარეშე ddH2O | 1,7 მლ | 10 მლ |
შესანიშნავი დასაწყისისთვის და Consumer Supreme არის ჩვენი სახელმძღვანელო, რათა მივაწოდოთ საუკეთესო სერვისები ჩვენს მყიდველებს. ამ დღეებში, ჩვენ მაქსიმალურად ვცდილობთ ვიყოთ ჩვენი ინდუსტრიის საუკეთესო ექსპორტიორებს შორის, რათა დავაკმაყოფილოთ მყიდველები OEM Factory for High Fidelity Rt-Qpcr 2X One-Step Multiplex Master Mix, გპირდებით, რომ მოგაწოდოთ ჩვენი უმაღლესი ხარისხის ეკონომიური პროდუქტები და მოგაწოდოთ უმაღლესი ხარისხის მომსახურება.
OEM ქარხანა ამისთვისChina Taq დნმ პოლიმერაზა და Qpcrუმაღლესი და განსაკუთრებული სერვისით, ჩვენ კარგად განვითარებულები ვართ ჩვენს მომხმარებლებთან ერთად.ექსპერტიზა და ნოუ-ჰაუ უზრუნველყოფს, რომ ჩვენ ყოველთვის ვსარგებლობთ ჩვენი მომხმარებლების ნდობით ჩვენს ბიზნეს საქმიანობაში."ხარისხი", "პატიოსნება" და "მომსახურება" ჩვენი პრინციპია.ჩვენი ერთგულება და ვალდებულებები პატივისცემით რჩება თქვენს სამსახურში.დაგვიკავშირდით დღეს დამატებითი ინფორმაციისთვის დაგვიკავშირდით ახლავე.
რეალურ დროში PCR პრაიმერის დიზაინის პრინციპები
Forward Primer და Reverse Primer
Real Time PCR-სთვის პრაიმერის დიზაინი ძალიან მნიშვნელოვანია.პრაიმერები დაკავშირებულია PCR გაძლიერების სპეციფიკასთან და ეფექტურობასთან და შეიძლება შეიქმნას შემდეგი პრინციპების მიხედვით:
- პრაიმერის სიგრძე: 18-30bp.
- GC შემცველობა: 40-60%.
- Tm მნიშვნელობა: პრაიმერის დიზაინის პროგრამულ უზრუნველყოფას, როგორიცაა Primer 5, შეუძლია პრაიმერის Tm მნიშვნელობა მისცეს.ზედა და ქვედა დინების პრაიმერების Tm მნიშვნელობები უნდა იყოს რაც შეიძლება ახლოს.ასევე შეიძლება გამოყენებულ იქნას Tm გამოთვლის ფორმულა: Tm = 4 °C (G + C) + 2 °C (A + T).PCR-ის ჩატარებისას, პრაიმერის Tm მნიშვნელობის 5 °C-ზე დაბალი ტემპერატურა, როგორც წესი, შეირჩევა ანეილირების ტემპერატურად (შედუღების ტემპერატურის შესაბამისმა ზრდამ შეიძლება გაზარდოს PCR რეაქციის სპეციფიკა).
- პრაიმერი და PCR პროდუქტები:
- დიზაინის პრაიმერის PCR გამაძლიერებელი პროდუქტის სიგრძე სასურველია იყოს 100-150bp.
- შეძლებისდაგვარად თავიდან უნდა იქნას აცილებული დიზაინის პრაიმერები შაბლონის მეორად სტრუქტურულ ზონაში.
- მოერიდეთ 2 ან მეტი დამატებითი ფუძის წარმოქმნას ზედა და ქვედა დინების პრაიმერების 3' ბოლოებს შორის.
- პრაიმერის 3' ტერმინალის ბაზა არ შეიძლება იყოს 3 დამატებითი თანმიმდევრული G ან C.
- თავად პრაიმერებს არ შეიძლება ჰქონდეთ დამატებითი სტრუქტურები, წინააღმდეგ შემთხვევაში წარმოიქმნება თმის სამაგრი სტრუქტურა, რაც გავლენას მოახდენს PCR გაძლიერებაზე.
- ATCG უნდა განაწილდეს რაც შეიძლება თანაბრად პრაიმერის თანმიმდევრობით და 3' ტერმინალური ბაზა თავიდან უნდა იქნას აცილებული, როგორც T.
დანართი1: Cell პირდაპირიRT-qPCR ნაკრების კომპონენტიt დანამატის პაკეტი
1.უჯრედის ლიზისის ხსნარი
უჯრედის ლიზისის ხსნარი | |||
ნაკრების კომპონენტები (24 ჭაბურღილის ლიზის სისტემა / ჭა) | DRT-01011-A1 | DRT-01011-A2 | |
100 ტ | 500 ტ | ||
ნაწილიმე | ბუფერი CL | 20 მლ | 100 მლ |
Foregene Protease Plus II | 400 მლ | 1 მლ × 2 | |
ბუფერი ST | 1 მლ × 2 | 10 მლ | |
ნაწილიII | დნმ-ის საშლელი | 400 მლ | 1 მლ × 2 |
RT მიქსი | |
ნაკრების კომპონენტები (20 მლ რეაქციის სისტემა) | DRT-01011-B1 |
200 ტ | |
5× პირდაპირი RT მიქსი | 800 მლ |
RNase-ის გარეშე ddH2O | 1.7 მლ × 2 |
qPCR Mix | ||
ნაკრების კომპონენტები (20 მლ რეაქციის სისტემა) | DRT-01021-C1 | DRT-01021-C2 |
200 ტ | 1000 ტ | |
2× პირდაპირი qPCR Mix-Taqman | 1 მლ × 2 | 1.7 მლ × 6 |
20× ROX Reference საღებავი | 40 მლ | 200 მლ |
RNase-ის გარეშე ddH2O | 1,7 მლ | 10 მლ |
ინსტრუქციის სახელმძღვანელოები: