ჩვენ ყოველთვის ვფიქრობთ და ვვარჯიშობთ ვითარების ცვლილების შესაბამისად და ვიზრდებით.ჩვენი მიზანია მივაღწიოთ უფრო მდიდარი გონებისა და სხეულების მიღწევას, ასევე ვიცხოვროთ პროფესიონალური მაგნიტური ვირუსული Rna ნუკლეინის მჟავის იზოლაციის გამწმენდი წინასწარ შეფუთული კომპლექტების საბითუმო დილერებისთვის.ვიმედოვნებთ, რომ ჩვენ შეგვიძლია ადვილად გვქონდეს სასიამოვნო პარტნიორობა ბიზნესმენებთან მთელი გარემოდან.
ჩვენ ყოველთვის ვფიქრობთ და ვვარჯიშობთ ვითარების ცვლილების შესაბამისად და ვიზრდებით.ჩვენი მიზანია მივაღწიოთ უფრო მდიდარ გონებას და სხეულს, ისევე როგორც ცხოვრებასჩინეთის უნივერსალური Rna დნმ-ის რეაგენტები და ავტომატური ნუკლეინის მჟავის გამწმენდი, ჩვენ ვისწრაფვით დავაკმაყოფილოთ ჩვენი მომხმარებლების მოთხოვნები გლობალურად.ჩვენი საქონლისა და მომსახურების ასორტიმენტი მუდმივად ფართოვდება მომხმარებელთა მოთხოვნების დასაკმაყოფილებლად.ჩვენ მივესალმებით ახალ და ძველ მომხმარებლებს ცხოვრების ყველა სფეროდან, რომ დაგვიკავშირდნენ მომავალი საქმიანი ურთიერთობებისა და ურთიერთ წარმატების მისაღწევად!
ინსტრუქციის სახელმძღვანელოები:

 ჩვენ ყოველთვის ვფიქრობთ და ვვარჯიშობთ ვითარების ცვლილების შესაბამისად და ვიზრდებით.ჩვენი მიზანია მივაღწიოთ უფრო მდიდარი გონებისა და სხეულების მიღწევას, ასევე ვიცხოვროთ პროფესიონალური მაგნიტური ვირუსული Rna ნუკლეინის მჟავის იზოლაციის გამწმენდი წინასწარ შეფუთული კომპლექტების საბითუმო დილერებისთვის.ვიმედოვნებთ, რომ ჩვენ შეგვიძლია ადვილად გვქონდეს სასიამოვნო პარტნიორობა ბიზნესმენებთან მთელი გარემოდან.
საბითუმო დილერებიჩინეთის უნივერსალური Rna დნმ-ის რეაგენტები და ავტომატური ნუკლეინის მჟავის გამწმენდი, ჩვენ ვისწრაფვით დავაკმაყოფილოთ ჩვენი მომხმარებლების მოთხოვნები გლობალურად.ჩვენი საქონლისა და მომსახურების ასორტიმენტი მუდმივად ფართოვდება მომხმარებელთა მოთხოვნების დასაკმაყოფილებლად.ჩვენ მივესალმებით ახალ და ძველ მომხმარებლებს ცხოვრების ყველა სფეროდან, რომ დაგვიკავშირდნენ მომავალი საქმიანი ურთიერთობებისა და ურთიერთ წარმატების მისაღწევად!

პრობლემის ანალიზის გზამკვლევი

ქვემოთ მოცემულია იმ პრობლემების ანალიზი, რომლებიც შეიძლება შეგხვდეთმცენარე სულRNA extraction will help you with your experiments. In addition, for other experimental or technical problems in addition to operating instructions and problem analysis, we have dedicated technical support to help you. If you have any needs, please contact us at: 028-83360257 or E-mali : Tech@foregene.com.

დატრიალების სვეტი ჩაკეტილია

სპინის სვეტის ბლოკირება გამოიწვევს რნმ-ის გამოსავლიანობის შემცირებას ან თუნდაც ვერ გაწმენდას რნმ-ის მისაღებად, ხოლო მიღებული რნმ-ის ხარისხი დაბალი იქნება.

საერთო მიზეზების ანალიზი:

1. ნიმუში მთლიანად არ არის გატეხილი.

ნიმუშის არასრულმა ფრაგმენტაციამ შეიძლება დაბლოკოს დნმ-ის გამწმენდი სვეტი, რაც ასევე შეიძლება გავლენა იქონიოს რნმ-ის გამომუშავებაზე და ხარისხზე.ჩვენ გირჩევთ, რომ ნიმუშების ფრაგმენტაციის შესრულებისას, სწრაფად დაფქვათ საკმარისი რაოდენობით თხევადი აზოტი, რათა მაქსიმალურად დაიშალოს ქსოვილები, როგორიცაა უჯრედის კედლები და ნიმუშების უჯრედული გარსი.პოლიფენოლ პოლისაქარიდების მცენარეული ნიმუშებისთვის, ჩვენ გირჩევთ გამოიყენოთ Plant Total RNA Isolation Kit Plus.

2. ასპირაცია დნმ-ის გამწმენდი სვეტის იზოლირებული ზენატანი, ასპირაცია შესაძლებელია უჯრედის ნარჩენების მარცვლები.

ასპირირებულ უჯრედის ნამსხვრევების მარცვლებს შეუძლიათ დაბლოკოს მხოლოდ რნმ-ის სვეტი რნმ-ის ადსორბციის პროცედურების დროს (იხილეთ პროცედურის ნაბიჯი 5, პოლისაქარიდული პოლიფენოლის პროცედურის ნაბიჯი 6).ჩვენ გირჩევთ, რომ ფრთხილად იყოთ ამ სუპერნატანტის ასპირაციისას, რათა თავიდან აიცილოთ უჯრედული ნარჩენების ასპირაცია.

3. ნიმუშის საწყისი რაოდენობა ძალიან დიდია.

ნიმუშის გადაჭარბებული გამოყენება გამოიწვევს ნიმუშის არასრულ ფრაგმენტაციას ან უჯრედების არასრულ ლიზას ბუფერული PRL1-ით ან ბუფერული PSL1-ით, რაც გამოიწვევს გამწმენდი ოპერაციების ჩაკეტილ გამწმენდ სვეტს.მცენარეთა ტოტალური რნმ-ის იზოლაციის კომპლექტს აქვს საწყისი მაქსიმუმი 50 მგ საოპერაციო ნიმუშის ერთჯერადი გაწმენდისთვის.პოლიფენოლ პოლისაქარიდების მცენარეული ნიმუშებისთვის, ჩვენ გირჩევთ, სცადოთ მცენარეთა ტოტალური რნმ-ის იზოლაციის ნაკრები პლუსი.

4. ცენტრიფუგის ტემპერატურა ძალიან დაბალია.

მთლიანი რნმ-ის იზოლაცია და გაწმენდა, გარდა ნიმუშის ქსოვილის თხევადი აზოტის მოშლისა, ყველა ნაბიჯი შესრულებულია ოთახის ტემპერატურაზე (20-25 °C).ზოგიერთ დაბალი ტემპერატურის ცენტრიფუგას აქვს 20 °C-ზე დაბალი ტემპერატურა, რამაც შეიძლება გამოიწვიოს დნმ-ის გამწმენდი სვეტის და/ან მხოლოდ რნმ-ის სვეტის ბლოკირება.თუ ეს მოხდება, დააყენეთ ცენტრიფუგის ტემპერატურა 20-25 °C-მდე და წინასწარ გაათბეთ ლიზისური ნარევი და/ან ეთანოლის გამოყოფის სუპერნატანტის დამატება 37 °C-მდე.

არ არის მოპოვებული რნმ ან რნმ-ის გამოსავალი დაბალია

როგორც წესი, არსებობს მრავალი ფაქტორი, რომელიც გავლენას ახდენს აღდგენის ეფექტურობაზე, როგორიცაა: ნიმუშის რნმ-ის შემცველობა, ოპერაციის მეთოდი, გამორეცხვის მოცულობა და ა.შ.

საერთო მიზეზების ანალიზი შემდეგნაირად:

1.ოპერაციის დროს ჩატარდა ყინულის აბაზანა ან დაბალი ტემპერატურის (4°C) ცენტრიფუგაცია.

შემოთავაზება: მთელი პროცესის განმავლობაში იმუშავეთ ოთახის ტემპერატურაზე (15-25°C), არ გააკეთოთ ყინულის აბაზანა და დაბალი ტემპერატურის ცენტრიფუგაცია.

       2.რნმ დეგრადირებულია ნიმუშის არასათანადო შენარჩუნების ან ნიმუშის გრძელვადიანი შენარჩუნების გამო.

რეკომენდაცია: ახლად შეგროვებული ნიმუშები სწრაფად უნდა გაიყინოს თხევად აზოტში და შემდეგ ინახებოდეს -80°C-ზე დიდი ხნის განმავლობაში, თავიდან აიცილოთ ნიმუშების განმეორებითი გაყინვა და გალღობა;ან დაუყოვნებლივ დაასველეთ ნიმუშები რნმ-ის სტაბილიზატორის RNA ხსნარში (ცხოველის ნიმუშები).

       3.ნიმუშის არასაკმარისი ფრაგმენტაცია და ლიზისი იწვევს გამწმენდი სვეტის ბლოკირებას.

წინადადება: ქსოვილის დაფქვისას დარწმუნდით, რომ ქსოვილი საკმარისად არის დაფქული და სწრაფად გადაიტანეთ იგი წინასწარ მომზადებულ ბუფერ PSL1-ში (დაადასტურეთ, რომ დამატებულია β-ME-ს სწორი პროპორცია, იხილეთ პროცედურის ნაბიჯი 1).

4.ელუენტი დამატებულია არასწორად.

შემოთავაზება: დარწმუნდით, რომ RNase-ის გარეშე ddH₂O წვეთოვანია გამწმენდი სვეტის მემბრანის შუაში.

5. აბსოლუტური ეთანოლის სწორი მოცულობა არ დაემატა ბუფერ PSL2-ს ან ბუფერს PRW2-ს.

წინადადება: გთხოვთ, მიჰყევით ინსტრუქციას, დაამატეთ აბსოლუტური ეთანოლის სწორი მოცულობა ბუფერ PSL2-სა და Buffer PRW2-ში და კარგად აურიეთ ნაკრების გამოყენებამდე.

6. ქსოვილის ნიმუშის რაოდენობა შეუსაბამოა.

შემოთავაზება: გამოიყენეთ 50 მგ ქსოვილი 500 μl ბუფერ PSL1-ზე.ძალიან ბევრი ქსოვილის გამოყენება შეამცირებს მოპოვებული რნმ-ის რაოდენობას და შედეგად მიღებული რნმ-ის სისუფთავე ასევე შემცირდება.ჩვენ მკაცრად გირჩევთ, რომ ნიმუშის საწყისი დოზა არ უნდა აღემატებოდეს 50 მგ-ს რნმ-ის ექსტრაქციის ოპერაციაზე.

7. გამორეცხვის შეუსაბამო მოცულობა ან არასრული ელუცია.

შემოთავაზება: გამწმენდი სვეტის ელუენტის მოცულობა არის 50-200 μl;თუ გამორეცხვის ეფექტი არ არის დამაკმაყოფილებელი, რეკომენდებულია დროის გახანგრძლივება ოთახის ტემპერატურაზე წინასწარ გახურებული RNase-ის გარეშე ddH-ის დამატების შემდეგ.₂O, როგორიცაა 5-10 წთ.

8. გამწმენდ სვეტს აქვს ეთანოლის ნარჩენი ბუფერი PRW2-ით გარეცხვის შემდეგ.

   წინადადება: თუ ცარიელი მილის ცენტრიფუგირება ხდება 1 წუთის განმავლობაში და ბუფერ PRW2-ში გარეცხვის შემდეგ ჯერ კიდევ რჩება ეთანოლი, შეგიძლიათ გაზარდოთ ცარიელი მილის ცენტრიფუგაციის დრო 2 წთ-მდე, ან განათავსოთ გამწმენდი სვეტი ოთახის ტემპერატურაზე 5 წუთის განმავლობაში, რათა სრულად მოიხსნას ნარჩენი ეთანოლი.

9. ნაკრები არასწორად იქნა გამოყენებული.

   შემოთავაზება: პოლიფენოლური პოლისაქარიდების მცენარეული ნიმუშებისთვის, ჩვეულებრივი კომპლექტების გამოყენებით, როგორიცაა Plant Total RNA Isolation Kit, შეიძლება ვერ მივიღოთ იდეალური რნმ-ის ნიმუშები.ჩვენ გირჩევთ გამოიყენოთ Plant Total RNA IsolationKit Plus, რომელიც სპეციალურად შექმნილია პოლიფენოლური პოლისაქარიდის მცენარის ნიმუშებისთვის.სპეციალურად შემუშავებული ნაკრები პოლიფენოლისა და პოლისაქარიდის მცენარის ნიმუშებიდან რნმ-ის მოსაპოვებლად.

OD260/OD280 მნიშვნელობა დაბალია

რნმ-ის ელუცია ddH-ით₂O და გამოიყენება სპექტროფოტომეტრის ჩვენებისთვის, იწვევს დაბალ OD260/OD280 მნიშვნელობებს.ჩვენ გირჩევთ გამოიყენოთ 10 მმ Tris-HCl, pH 7.5 (და არა RNase-ის თავისუფალი ddH₂O რნმ-ის გამორეცხვა) შედარებით სწორი OD260/OD280 მნიშვნელობების მისაღებად, იხილეთ „რნმ-ის კონცენტრაციისა და გამწმენდის ანალიზი“ მე-19 გვერდზე.

გაწმენდილი რნმ იშლება

გასუფთავებული რნმ-ის ხარისხი დაკავშირებულია ისეთ ფაქტორებთან, როგორიცაა ნიმუშის შენარჩუნება, RNase დაბინძურება და მანიპულირება.

საერთო მიზეზების ანალიზი:

1. ქსოვილის ნიმუშები არ იყო შენახული დროულად შეგროვების შემდეგ.

    რეკომენდაცია: თუ ქსოვილის ნიმუშები დროულად არ გამოიყენება შეგროვების შემდეგ, გთხოვთ, დაუყოვნებლივ შეინახოთ ისინი თხევად აზოტში დაბალ ტემპერატურაზე ან გადაიტანეთ -80°C-ზე ხანგრძლივი შენახვისთვის თხევად აზოტში სწრაფი გაყინვის შემდეგ, ან დაუყოვნებლივ ჩაეფლოთ რნმ-ის სტაბილიზატორის RNA ხსნარში (ცხოველის ნიმუშები).რნმ-ის ექსტრაქციისთვის შეეცადეთ გამოიყენოთ ახლად შეგროვებული ქსოვილის ნიმუშები.

2.ქსოვილის ნიმუშების განმეორებითი გაყინვა და დათბობა.

   შემოთავაზება: ქსოვილის ნიმუშების შენახვისას უმჯობესია დაჭრათ ისინი შესანარჩუნებლად პატარა ნაჭრებად და გამოყენებისას მათი ნაწილი ამოიღოთ, რათა თავიდან აიცილოთ რნმ-ის დეგრადაცია, რომელიც გამოწვეულია ნიმუშების განმეორებითი გაყინვით და დნობით.

3.RNase შეყვანილია საოპერაციო ოთახში ან არ აცვიათ ერთჯერადი ხელთათმანები, ნიღბები და ა.შ.

   შემოთავაზება: რნმ-ის ექსტრაქციის ექსპერიმენტები საუკეთესოდ ჩატარდება რნმ-ის ცალკეულ ოპერაციებში და ლაბორატორიული მაგიდა უნდა გაიწმინდოს ექსპერიმენტამდე, ხოლო ექსპერიმენტის დროს უნდა ატაროთ ერთჯერადი ხელთათმანები და ნიღბები, რათა თავიდან იქნას აცილებული რნმ-ის დეგრადაცია, რომელიც გამოწვეულია RNase-ს შეყვანით.

4. გამოყენებისას რეაგენტი დაბინძურებულია RNase-ით.

   შემოთავაზება: ჩაანაცვლეთ მცენარეთა მთლიანი რნმ-ის ექსტრაქციის ნაკრების ახალი სერიით შესაბამისი ექსპერიმენტებისთვის.

5. ცენტრიფუგის მილები და პიპეტების წვერები, რომლებიც გამოიყენება რნმ-ით მანიპულირებისთვის, დაბინძურებულია RNase-ით.

შემოთავაზება: დარწმუნდით, რომ ცენტრიფუგის მილები, პიპეტების წვერები, პიპეტები და ა.შ., რომლებიც გამოიყენება რნმ-ის ექსტრაქციაში, არ შეიცავს RNase-ს.

ინსტრუქციის სახელმძღვანელოები:

Plant Total RNA Isolation Kit ინსტრუქციის სახელმძღვანელო