პირდაპირი RT-qPCR ნაკრები
ნაკრების აღწერა:
◮ პირდაპირი RT-qPCR ნაკრები, Foregene-ის მიერ შემუშავებული Foreasy Reverse Transcriptase და Foreasy HS Taq დნმ პოლიმერაზას გამოყენებით, უნიკალური რეაქციის ბუფერით, ხდის ამ კომპლექტს ძლიერ წინააღმდეგობასა და თავსებადობას და მას შეუძლია პირდაპირ შეამოწმოს რეაქცია Foregene Lysis სისტემის შაბლონად გამოყენებით.ამ ნაკრების გამოყენება შესაძლებელია COVID-19-ის ნუკლეინის მჟავების აღმოჩენის ნაკრებისა და სხვა პათოგენური ბაქტერიების ნუკლეინის მჟავების აღმოჩენის ნაკრების შემუშავებისთვის.
აღწერა
პირდაპირი RT-qPCR ნაკრები უზრუნველყოფს ცალკე შეფუთულ RT-qPCR ბუფერს და მაღალეფექტურ ფერმენტსნარევი (Taq, M-MLV, RI), რაც მას ხელსაყრელ ხდის back-end კომპლექტების და სისტემის შესაქმნელადკორექტირება, მარტივი შემოწმების ფარგლებში.
სპეციფიკაციები
500T, 50000T
ნაკრების კომპონენტები
| ნაკრების შიგთავსი (20 μL რეაქციის სისტემა) | IM-05111-01 | IM-05112-01 |
| 500 ტ | 50000 ტ | |
| პირდაპირი ფერმენტის ნარევი | 500 მლ× 1 | 50 მლ× 1 |
| 2× პირდაპირი RT-qPCR ბუფერი | 1 მლ× 5 | 500 მლ× 1 |
| ინსტრუქცია | 1 | 1 |
საოპერაციო ნაბიჯები
რეაგენტის მომზადებამდე კომპლექტში შემავალი ყველა რეაგენტი უნდა გაიყინოს ოთახის ტემპერატურაზე და ნაზად შეურიოს.
A: მოამზადე of შაბლონი და რეაგენტი
1. მოამზადეთ მზა რნმ-ის შაბლონი (რეკომენდებულია Foregene Total RNA Isolation Kit-ის სერიის ნაკრების გამოყენება რნმ შაბლონის ამოსაღებად და გასაწმენდად) ან კრეკინგის პროდუქტის (რეკომენდებულია Foregene Lysis სისტემის გამოყენება), სპეციფიკური პრაიმერები (10 μM) და სხვა შესაბამისი სახარჯო მასალები, ხელსაწყო.
2. მოათავსეთ 2× პირდაპირი RT-qPCR ბუფერი, RNase-ის გარეშე ddH2O და 20× ROX საორიენტაციო საღებავი (თუ'საჭიროა) ყუთში ყინულით, რომ ისინი ბუნებრივად დნება და ნაზად აურიეთ.
B: მოამზადე of RT-qPCR სისტემა
მაგიდა 1 : მოამზადე of RT-qPCR sსისტემა
| Კომპონენტი | მოცულობა | საბოლოო კონცენტრაცია |
| 2× პირდაპირი RT-qPCR ბუფერი | 10 მლ | 1× |
| პირდაპირი ფერმენტის ნარევი | 1μL | |
| წინა პრაიმერი (10 μM) | 0.8 მლ | 50-900ნმ |
| უკუ პრაიმერი (10 μM) | 0.8 მლ | 50-900ნმ |
| ზონდი (4 მკმ) | 1μL | 200 ნმ |
| შაბლონი (რნმ ან ლიზატი) | X μL | |
| 20×ROX სარეფერენტო საღებავი | - | 1* |
| RNase-FreeddH2O | (6.4-X) μL | |
| მთლიანი მოცულობა | 20μL |
C: კომპლექტი The RT-qPCR რეაქცია პროგრამა
მაგიდა 2 : RT-qPCR რეაქციაon პროგრამა დაყენება (ამისთვის მაგალითი: ორი-ნაბიჯი მეთოდი)
| ნაბიჯი | ტემპერატურა | დრო | ციკლები | შინაარსი | |
| 1 | 50℃ | 15 წთ | 1* | 1 | საპირისპირო ტრანსკრიფცია |
| 2 | 95℃ | 1 წუთი | 1 | წინასწარი დენატურაცია | |
| 3 | 95℃ | 10 წმ | 40-45 | დენატურაცია | |
| 60℃ | 30 წამი 2* | Anneal/Extension | |||
შენახვა და შენახვის ვადა
- ნაკრები უნდა ინახებოდეს -20-ზე± 5℃.მოქმედების ვადაა 12 თვე.
- მოერიდეთ გაყინვა-დათბობის განმეორებით ციკლებს (<5 ციკლი).
