ვირუსული დნმ-ის და რნმ-ის საიზოლაციო ნაკრები ვირუსული დნმ-ისა და რნმ-ის ექსტრაქციის გამწმენდი მოსამზადებელი ნაკრები
სპეციფიკაციები
50 მოსამზადებელი, 200 მოსამზადებელი
ვირუსული რნმ ნუკლეინის მჟავის გამწმენდი ექსტრაქციის საიზოლაციო ნაკრები იყენებს სპინის სვეტს და ფორმულას, რომელიც შემუშავებულია Foregene-ის მიერ, რომელსაც შეუძლია ეფექტურად ამოიღოს მაღალი სისუფთავის და მაღალი ხარისხის ვირუსული რნმ ისეთი ნიმუშებიდან, როგორიცაა პლაზმა, შრატი, უჯრედისგან თავისუფალი სხეულის სითხე და უჯრედული კულტურის სუპერნატანტი.ნაკრები სპეციალურად ამატებს Linear Acrylamide-ს, რომელსაც შეუძლია ადვილად აღიქვას ნიმუშებიდან მცირე რაოდენობით რნმ.რნმ-მხოლოდ სვეტს შეუძლია ეფექტურად დააკავშიროს რნმ.კომპლექტს შეუძლია ერთდროულად დიდი რაოდენობით ნიმუშების დამუშავება.
მთელი ნაკრები არ შეიცავს RNase-ს, ამიტომ გაწმენდილი რნმ არ დაიშლება.ბუფერს viRW1 და ბუფერს viRW2 შეუძლია უზრუნველყოს, რომ მიღებული ვირუსული ნუკლეინის მჟავა არ შეიცავს ცილებს, ნუკლეაზას ან სხვა მინარევებს, რომელიც შეიძლება გამოყენებულ იქნას უშუალოდ ქვემოთ მოლეკულური ბიოლოგიის ექსპერიმენტებისთვის.
ნაკრების კომპონენტები
| ხაზოვანი აკრილამიდი |
| ბუფერი DRL |
| ბუფერი RW1, ბუფერი RW2 |
| RNase-ის გარეშე ddH2O |
| დნმ/რნმ სვეტი |
| ინსტრუქციები |
მახასიათებლები და უპირატესობები
■ მუშაობა ოთახის ტემპერატურაზე (15-25℃) მთელი პროცესის განმავლობაში, ყინულის აბაზანისა და დაბალი ტემპერატურის ცენტრიფუგაციის გარეშე.
■ სრული ნაკრები RNase-ის გარეშე, არ არის საჭირო რნმ-ის დეგრადაციის შესახებ ფიქრი.
■ ნუკლეინის მჟავის მაღალი მოსავლიანობა: მხოლოდ დნმ/რნმ-ის სვეტი და უნიკალური ფორმულა ეფექტურად ასუფთავებს დნმ-ს და რნმ-ს.
■ ნიმუშის დამუშავების დიდი სიმძლავრე: ყოველ ჯერზე შესაძლებელია 200მკლ-მდე ნიმუშების დამუშავება.
■ სწრაფი სიჩქარე: მარტივი მუშაობა და შეიძლება დასრულდეს 20 წუთში.
■ უსაფრთხოება: არ არის საჭირო ორგანული რეაქტივი.
■ მაღალი ხარისხი: გაწმენდილი რნმ-ის ფრაგმენტები არის მაღალი სისუფთავის, პროტეინისა და სხვა მინარევებისაგან თავისუფალი და შეუძლია შეასრულოს სხვადასხვა ექსპერიმენტული გამოყენება.
ნაკრების აპლიკაცია
იგი შესაფერისია ვირუსული ნუკლეინის მჟავის ექსტრაქციისა და გასაწმენდად ისეთ ნიმუშებში, როგორიცაა პლაზმა, შრატი, უჯრედისუფალი სხეულის სითხე და უჯრედული კულტურის სუპერნატანტი.
სამუშაო ნაკადი
დიაგრამა
შენახვა და შენახვის ვადა
■ ამ ნაკრების შენახვა შესაძლებელია 24 თვის განმავლობაში მშრალ პირობებში ოთახის ტემპერატურაზე (15-25℃);თუ საჭიროა მისი შენახვა უფრო დიდი ხნის განმავლობაში, მისი შენახვა შესაძლებელია 2–8℃ ტემპერატურაზე.
■ ხაზოვანი აკრილამიდის ხსნარი შეიძლება ინახებოდეს ოთახის ტემპერატურაზე 7 დღის განმავლობაში;ნაკრების მიღების შემდეგ, გთხოვთ, ამოიღოთ იგი და შეინახოთ -20°C ტემპერატურაზე.
■ ხაზოვანი აკრილამიდის ბუფერულ DRL-ში დამატების შემდეგ, მისი შენახვა შესაძლებელია 2-8°C ტემპერატურაზე 48 სთ-მდე.გთხოვთ გამოიყენოთ მზა ხსნარი.
პრობლემის ანალიზის გზამკვლევი
ქვემოთ მოცემულია იმ პრობლემების ანალიზი, რომლებიც შეიძლება შეგვხვდეს ვირუსული დნმ/რნმ-ის ექსტრაქციისას, იმ იმედით, რომ სასარგებლო იქნება თქვენი ექსპერიმენტებისთვის.გარდა ამისა, სხვა ექსპერიმენტული ან ტექნიკური პრობლემებისთვის, გარდა ექსპლუატაციის ინსტრუქციისა და პრობლემის ანალიზისა, ჩვენ გამოვიყენეთ ტექნიკური მხარდაჭერა, რათა დაგეხმაროთ.თუ თქვენ გაქვთ რაიმე საჭიროება, გთხოვთ დაგვიკავშირდეთ: 028-83360257 ან ელ.
Tech@foregene.com.
არ არის ნუკლეინის მჟავის მოპოვება ან დაბალი ნუკლეინის მჟავა
როგორც წესი, არსებობს მრავალი ფაქტორი, რომელიც გავლენას ახდენს აღდგენის ეფექტურობაზე, როგორიცაა: ნუკლეინის მჟავის ნიმუშის შემცველობა, ოპერაციის მეთოდი, გამორეცხვის მოცულობა და ა.შ.
საერთო მიზეზების ანალიზი:
1. პროცედურის დროს ჩატარდა ყინულის აბაზანა ან დაბალი ტემპერატურის (4°C) ცენტრიფუგაცია.
შემოთავაზება: მთელი პროცესის განმავლობაში იმუშავეთ ოთახის ტემპერატურაზე (15-25°C), არ გააკეთოთ ყინულის აბაზანა და დაბალი ტემპერატურის ცენტრიფუგაცია.
2. ნიმუში ინახებოდა არასწორად ან ნიმუში ინახება ძალიან დიდხანს.
რეკომენდაცია: შეინახეთ ნიმუშები -80°C ტემპერატურაზე და მოერიდეთ განმეორებით გაყინვას და გალღობას;შეეცადეთ გამოიყენოთ ახლად შეგროვებული ნიმუშები ნუკლეინის მჟავას ექსტრაქციისთვის.
3. ნიმუშის არასაკმარისი ლიზისი.
რეკომენდაცია: დარწმუნდით, რომ ნიმუში და ლიზის სამუშაო ხსნარი კარგად არის შერეული და ინკუბირებული ოთახის ტემპერატურაზე (15-25°C) 10 წუთის განმავლობაში.
4. ელუენტის არასწორი დამატება.
შემოთავაზება: დარწმუნდით, რომ RNase-ის გარეშე ddH2O წვეთობრივად დაემატება გამწმენდი სვეტის მემბრანის შუაში და არ ჩამოაგდოთ იგი გამწმენდი სვეტის რგოლზე.
5. აბსოლუტური ეთანოლის სწორი მოცულობა არ დაემატა ბუფერ RW2-ს.
წინადადება: გთხოვთ, მიჰყევით ინსტრუქციას, დაამატეთ აბსოლუტური ეთანოლის სწორი მოცულობა ბუფერ RW2-ში და კარგად აურიეთ ნაკრების გამოყენებამდე.
6. ნიმუშის შეუსაბამო მოცულობა.
შემოთავაზება: 200µl ნიმუშის დამუშავება ხდება ყოველ 500μl Buffer DRL-ზე.ნიმუშების გადაჭარბებული დამუშავება გამოიწვევს ნუკლეინის მჟავას ექსტრაქციის ნაკლებ მოსავალს.
7. გამორეცხვის შეუსაბამო მოცულობა ან არასრული ელუცია.
რეკომენდაცია: გამწმენდი სვეტის ელუენტის მოცულობა არის 30-50μl;თუ გამორეცხვის ეფექტი არ არის დამაკმაყოფილებელი, რეკომენდებულია დროის გახანგრძლივება ოთახის ტემპერატურაზე წინასწარ გახურებული RNase-ის გარეშე ddH2O-ს დამატების შემდეგ, როგორიცაა 5-10 წუთი.
8. ეთანოლი რჩება სვეტზე ბუფერი RW2-ით გარეცხვის შემდეგ.
შემოთავაზება: თუ ეთანოლი რჩება ბუფერთან RW2 ცენტრიფუგაციის შემდეგ 2 წუთის განმავლობაში, სვეტი შეიძლება განთავსდეს ოთახის ტემპერატურაზე ცენტრიფუგაციის შემდეგ 5 წუთის განმავლობაში ნარჩენი ეთანოლის სრულად მოსაშორებლად.
გასუფთავებული ნუკლეინის მჟავა იშლება
გასუფთავებული ნუკლეინის მჟავის ხარისხი დაკავშირებულია ნიმუშის შენარჩუნებასთან, RNase დაბინძურებასთან, მუშაობასთან და სხვა ფაქტორებთან.საერთო მიზეზების ანალიზი:
1. შეგროვებული ნიმუშები დროულად არ ინახებოდა.
წინადადება: თუ ნიმუში არ იქნა გამოყენებული დროულად შეგროვების შემდეგ, გთხოვთ, დაუყოვნებლივ შეინახოთ იგი -80°C-ზე დაბალ ტემპერატურაზე.რნმ-ის ექსტრაქციისთვის შეეცადეთ გამოიყენოთ ახლად შეგროვებული ნიმუშები.
2. შეაგროვეთ ნიმუშები და გაყინეთ და გალღვეთ არაერთხელ.
წინადადება: მოერიდეთ გაყინვას და გალღობას (არა უმეტეს ერთხელ) ნიმუშების შეგროვებისა და შენახვის დროს, წინააღმდეგ შემთხვევაში ნუკლეინის მჟავას გამოსავლიანობა შემცირდება.
3. RNase შეყვანილია საოპერაციო ოთახში ან არ აცვიათ ერთჯერადი ხელთათმანები, ნიღბები და ა.შ.
რეკომენდაცია: რნმ-ის ექსტრაქციის ექსპერიმენტები საუკეთესოდ ჩატარდება რნმ-ის ცალკეულ საოპერაციო ოთახში და ექსპერიმენტამდე უნდა გაიწმინდოს ლაბორატორიული მაგიდა.
ატარეთ ერთჯერადი ხელთათმანები და ნიღბები ექსპერიმენტის დროს, რათა თავიდან აიცილოთ რნმ-ის დეგრადაცია, რომელიც გამოწვეულია RNase-ის შეყვანით.
4. გამოყენებისას რეაგენტი დაბინძურებული იყო RNase-ით.
რეკომენდაცია: შეცვალეთ ახალი ვირუსული დნმ/რნმ-ის საიზოლაციო ნაკრები შესაბამისი ექსპერიმენტებისთვის.
5. ცენტრიფუგის მილები და პიპეტების წვერები, რომლებიც გამოიყენება რნმ-ით მანიპულირებისთვის, დაბინძურებულია RNase-ით.
შემოთავაზება: დარწმუნდით, რომ ცენტრიფუგის მილები, პიპეტების წვერები, პიპეტები და ა.შ., რომლებიც გამოიყენება რნმ-ის ექსტრაქციისთვის, არ შეიცავს RNase-ს.
გაწმენდილი ნუკლეინის მჟავა გავლენას ახდენს ქვედა დინების ექსპერიმენტებზე
გამწმენდი სვეტით გაწმენდილი დნმ და რნმ, თუ მარილის იონებისა და ცილის შემცველობა ძალიან მაღალია, ეს გავლენას მოახდენს ქვედა დინებაში ექსპერიმენტებზე, როგორიცაა: PCR გაძლიერება, საპირისპირო ტრანსკრიფცია და ა.შ.
1. გამოყოფილ დნმ-ს და რნმ-ს აქვს ნარჩენი მარილის იონები.
წინადადება: დარწმუნდით, რომ აბსოლუტური ეთანოლის სწორი მოცულობა დაემატება Buffer RW2-ს და გარეცხეთ გამწმენდი სვეტი ორჯერ საოპერაციო ინსტრუქციებში მითითებული ცენტრიფუგაციის სიჩქარით;განახორციელეთ ცენტრიფუგაცია მარილის იონებით დაბინძურების შესამცირებლად.
2. გამორეცხულ დნმ-ს და რნმ-ს აქვს ეთანოლის ნარჩენები.
შემოთავაზება: ბუფერ RW2-ით რეცხვის დადასტურების შემდეგ, ჩაატარეთ ცარიელი მილის ცენტრიფუგაცია ოპერაციულ ინსტრუქციებში მითითებული ცენტრიფუგაციის სიჩქარით;თუ ჯერ კიდევ არის ეთანოლის ნარჩენები, შეგიძლიათ ცენტრიფუგა ცარიელი მილის და შემდეგ განათავსოთ იგი ოთახის ტემპერატურაზე 5 წუთის განმავლობაში, რათა ეთანოლის ნარჩენები მაქსიმალურად მოიხსნას.
ინსტრუქციის სახელმძღვანელოები:
ვირუსული დნმ და რნმ-ის იზოლაციის ნაკრები ინსტრუქციის სახელმძღვანელო
